Leucémie

Cette vidéo décrit la technique de coloration des cellules de moelle osseuse à l’aide de la coloration May-Grünwald Giemsa. Dans le protocole, nous colorerons les cellules myéloïdes murines de leucémie, les cellules C149, pour analyser la morphologie et le comptage différentiel.

Cette vidéo décrit l’enrichissement en lymphocytes T de la rate d’une souris par sélection négative à l’aide d’un séparateur magnétique. La technique consiste à cibler les autres cellules de l’échantillon pour la déplétion à l’aide d’anticorps ou de ligands dirigés contre des antigènes de surface cellulaire spécifiques.

Cette vidéo décrit la technique d’isolement des cellules positives au c-kit de la moelle osseuse d’une souris. Dans le protocole, nous isolerons des cellules positives c-kit d’une souris transgénique pour valider c-Fos et Dusp1 seuls ou ensemble en tant que cibles médicamenteuses dans la leucémie.

Cette vidéo décrit le protocole de coloration par immunofluorescence BrdU. La technique permet d’identifier les cellules dans différentes phases du cycle cellulaire. L’ajout de colorants d’ADN et le marquage des anticorps permettent une analyse détaillée du devenir des cellules de la phase S à des moments ultérieurs.

Cette vidéo décrit la technique d’isolement des cellules de leucémie lymphoïde chronique (LLC) du sang périphérique. Avec ce protocole, nous isolerons les cellules de la LLC à partir d’échantillons de sang de patients humains pour une génération efficace ultérieure de fractions nucléaires et cytoplasmiques.

La vidéo explique une façon de purifier les lymphocytes B par ciblage immunomagnétique et séparation de la suspension de cellules mononucléées du sang périphérique. La méthode consiste à marquer des types de cellules indésirables avec des anticorps ou des ligands spécifiques (liés à des particules magnétiques) ciblant des protéines de surface cellulaire spécifiques, à appauvrir de la suspension cellulaire hétérogène par séparation magnétique.

Cette vidéo décrit une méthode de séparation spatiale de trois sous-populations de cellules leucémiques : les cellules leucémiques suspendues flottant librement dans le milieu, les cellules leucémiques en phase brillante adhérant à la surface de la monocouche de cellules stromales mésenchymateuses et les cellules leucémiques en phase faible qui ont migré sous la monocouche de cellules stromales mésenchymateuses à partir de la co-culture 2D.

Cette vidéo décrit un protocole détaillé permettant d'isoler la moelle osseuse entière fraîche des membres postérieurs de la souris afin d'étudier les anomalies de la moelle osseuse chez les patients atteints de troubles sanguins tels que la leucémie.

Cette vidéo décrit la séparation des cellules de leucémie lymphoblastique aiguë des cellules stromales de la moelle osseuse à l’aide de colonnes de dextran G-10 réticulé de type gel dix. Cette méthode aide à récupérer la population de cellules tumorales qui ont migré sous les cellules stromales adhérentes de la moelle osseuse, générant une population de cellules tumorales « dim de phase ».

La vidéo décrit une méthode d’échantillonnage pour la collecte de sang périphérique à partir du sinus rétro-orbitaire d’une souris et l’isolement supplémentaire de cellules mononucléées dans le sang avec centrifugation à gradient de densité.

Cette vidéo décrit la technique d’aspiration de la moelle osseuse à partir de la colonne iliaque et la préparation du frottis pour la biopsie. Dans l’exemple, nous effectuons une ponction de la moelle osseuse d’un patient atteint de leucémie myéloïde aiguë (LMA) et examinons les cellules pour vérifier la présence d’une maladie résiduelle mesurable (MRM), un biomarqueur pronostique important.

Cette vidéo décrit un protocole pour la génération de cellules dendritiques - des cellules présentatrices d’antigènes clés qui activent les cellules T - à partir de la moelle osseuse d’une souris adulte.

Cette vidéo décrit le protocole permettant d’isoler les HSPC de la moelle osseuse et de les trier à l’aide d’une technique de tri cellulaire activée par fluorescence, qui est une méthode permettant d’obtenir des HSPC triées individuellement. Nous cultivons ces cellules triées pour obtenir des clones de HSPC.

Ce protocole décrit la technique d’isolement des cellules tumorales de leucémie aiguë lymphoblastique à cellules T marquées par fluorescence (LAL-T) d’un poisson-zèbre adulte et de leur quantification à l’aide d’un colorant bleu trypan.

Le protocole suivant décrit une méthode permettant d’isoler la population latérale de cellules tumorales de leucémie aiguë lymphoblastique à cellules T (LAL-T), composée de cellules souches, à partir d’un poisson-zèbre adulte. La population latérale manque de marqueurs cellulaires proéminents et nous utilisons donc le test d’efflux de colorant Hoechst 33342 pour les isoler.

Cette vidéo décrit le protocole de cisaillement de la chromatine à l’aide de la digestion enzymatique des nucléases micrococciques. Le cisaillement de la chromatine est une étape essentielle du flux de travail de l’immunoprécipitation de la chromatine ou ChIP, qui permet d’étudier l’interaction protéine-ADN dans les cellules de leucémie myéloïde chronique humaine. Dans le protocole de fonctionnalité, le cisaillement de la chromatine est effectué à l’aide de la sonication.

Cette vidéo décrit les dommages sélectifs des cellules leucémiques humaines à l’aide d’ultrasons à basse fréquence. Cette application des ultrasons à basse fréquence dans une condition préclinique in vitro démontre que la destruction cellulaire peut être obtenue afin d’examiner et de comparer les effets de la sonication sur la leucémie et les cellules normales.

Cet article décrit le protocole du dosage XTT qui est un test colorimétrique permettant d’évaluer la viabilité cellulaire et l’activité mitochondriale.

La vidéo décrit le test de marquage par impulsions par étapes de cellules de mammifères avec de la bromodéoxyuridine (BrdU) pour mesurer la prolifération cellulaire. L’absorption de BrdU permet le suivi temporel des cellules qui étaient en phase de synthèse à un moment précis, sans qu’il soit nécessaire de synchroniser les cellules.

Cette vidéo décrit la technique de co-culture 2D à long terme de cellules leucémiques avec des cellules stromales de moelle osseuse afin d’étudier leur interaction avec le microenvironnement de la moelle osseuse. Le modèle de coculture 2D utilise les cellules de leucémie lymphoblastique aiguë et le stromal ou les ostéoblastes de la moelle osseuse qui influencent le phénotype des cellules tumorales. Cette étude soutiendra l’étude des mécanismes qui sous-tendent la survie des cellules leucémiques...

Cette vidéo décrit la préparation des fractions subcellulaires à partir de cellules leucémiques, qui est une méthode pour générer des fractions cellulaires et nucléaires à partir de cellules leucémiques. Les fractions nucléaire et cytoplasmique peuvent être utilisées pour une analyse ultérieure en aval.

Ce protocole fournit une approche biochimique pour mesurer le taux d’acidification extracellulaire (ECAR) et le taux de consommation d’oxygène (OCR) des cellules leucémiques primaires avec le dosage du flux extracellulaire. L’évaluation du profil métabolique de ces cellules permet de caractériser leurs demandes, ce qui conduit à une thérapie personnalisée.

Cette vidéo décrit le protocole de dosage par immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), qui est une technique classique pour démontrer les interactions protéine-ADN. Cette technique est utilisée pour identifier les gènes cibles dans les cellules de leucémie lymphoïde chronique humaine.

Cette vidéo décrit le protocole de validation génétique par transfert de gènes cibles à l’aide de rétrovirus dans des lignées cellulaires de leucémie myéloïde chronique. Les rétrovirus agissent comme médiateur pour transférer le matériel génétique dans la cellule leucémique par le biais d’un processus appelé transduction, qui permet l’expression à long terme du gène cible. Cette méthode peut être appliquée à n’importe quelle cellule cible pour la validation génétique et le développement...

Cette vidéo décrit le protocole de l’unité de formation de colonies à base de méthylcellulose ou test UFC, qui permet d’identifier et de compter le nombre de colonies formées par les cellules leucémiques en réponse au traitement avec des composés anticancéreux.

Cette vidéo explique une méthode de chromatographie liquide quantitative à haute performance en phase inverse (RP-HPLC) pour mesurer le métabolisme de l’adénosine et des purines associées générées par la consommation d’AMP dans l’environnement extracellulaire des cellules cancéreuses leucémiques. Le protocole décrit un test RP-HPLC sensible, spécifique, fiable et reproductible, développé et validé pour la quantification des nucléotides et des nucléosides extracellulaires de la purine produits...