Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 3:57 min • April 30th, 2023
- Les lymphocytes T, une classe de lymphocytes, jouent un rôle actif dans la lutte contre les infections. Comme plusieurs autres types de cellules sanguines, les lymphocytes T immunocompétents sont présents dans la rate et les ganglions lymphatiques de la souris. Pour isoler sélectivement les lymphocytes T, prélevez la rate et les ganglions lymphatiques murins et faites-les macérer sur une passoire cellulaire. Rincer le tissu avec un milieu approprié pour obtenir une suspension unicellulaire.
Ajoutez du chlorure d’ammonium et de potassium, ou tampon ACK, pour lyser les globules rouges. Centrifugeuse pour séparer les cellules sanguines intactes du lysat. Jetez le surnageant et remettez les cellules en suspension dans un tampon approprié. Traitez la suspension avec un mélange d’anticorps anti-souris biotinylés pour cibler les cellules sanguines comme les granulocytes, les cellules B, les cellules NK et les érythrocytes restants. Les lymphocytes T ne sont pas ciblés et ne sont donc pas marqués.
Ensuite, ajoutez des microbilles magnétiques anti-biotine à la suspension. Toutes les cellules marquées à la biotine se lient aux microbilles. Lorsqu’elles sont maintenues sous l’influence d’un
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