Sélection immunomagnétique négative : une méthode pour purifier les lymphocytes B des cellules mononucléées du sang périphérique

Les cellules mononucléées du sang périphérique ou PBMC comprennent les cellules B, les cellules T, les cellules tueuses naturelles ou NK et les monocytes. Les lymphocytes B produisent des molécules d’immunoglobuline pour combattre l’infection. Dans la leucémie, ces cellules se multiplient et métastasent dans différents organes.

Pour isoler les lymphocytes B, commencez par une suspension de PBMC isolés. Ajoutez un mélange d’anticorps primaires dirigé contre des molécules spécifiques de surface cellulaire appelé cluster de différenciation ou CD. Des anticorps spécifiques se lient à la molécule CD-3 sur les lymphocytes T, à la molécule CD-14 sur les monocytes et à la molécule CD-16 sur les cellules NK, laissant les lymphocytes B non marqués.

Ensuite, lavez l’échantillon pour éliminer les anticorps non liés. Ajoutez des microbilles magnétiques conjuguées à des anticorps secondaires à l’échantillon. Les anticorps secondaires se lient à la région FC des anticorps primaires attachés à des cellules spécifiques. Placez le tube contenant la suspension cellulaire marquée sous l’influence d’un champ magnétique. Sur le terrain, les cellules marquées magnétiquement migrent et se lient à la paroi