Radioimmunothérapie préciblée : méthode d’administration ciblée de radionucléides thérapeutiques à des tumeurs

- La radio-immunothérapie préciblée ou PRIT utilise un immunoconjugué ou une construction d’anticorps qui se lie à un ligand radioactif tout en présentant une forte affinité envers un antigène de surface cellulaire spécifique de la tumeur. Pour pré-cibler, prélever la concentration souhaitée de ces anticorps dans une seringue traitée avec des protéines d’albumine sérique. Le traitement sérique empêche la liaison de ces anticorps aux parois de la seringue.

Ensuite, placez un modèle de souris porteuse d’une tumeur colorectale sous une lampe chauffante pour dilater sa veine de la queue. Injectez les anticorps dans la veine dilatée. Lorsque ces immunoconjugués atteignent le site tumoral, leur grande affinité envers l’antigène de surface cellulaire spécifique à la tumeur favorise leur accumulation dans le tissu.

Par la suite, prenez une dose appropriée du ligand radioactif. Administrez le radioligand dans la veine dilatée de la queue de la souris pré-ciblée. Une fois que ces molécules atteignent le site de la tumeur, elles se combinent avec les anticorps. La forte dose de rayonnement émise lors de la désintégration radioactive de ces ligands tue la tumeur ciblée tout en minimisant l’exposition aux cellules normales.

Dans le protocole suivant, nous montrerons une radio-immunothérapie préciblée utilisant des anticorps modifiés par le trans-cyclooctène et des radioligands de tétrazène marqués au lutécium-177 dans un modèle murin de cancer colorectal.

- Triez les souris nues athymiques femelles avec une xénogreffe de cancer colorectal afin que le volume tumoral moyen dans chaque cohorte soit à peu près égal. Pour ce faire, énumérez les numéros d’identification de l’animal, le motif de l’encoche de l’oreille et le volume de la tumeur dans trois colonnes distinctes d’un tableur. Triez les données du plus petit au plus grand volume tumoral. Dans une quatrième colonne, attribuez à chaque animal un numéro de cage.

Faites défiler les cages en forme de serpent jusqu’à ce que tous les animaux soient assignés à la cage. Une fois les cages attribuées, triez les données par numéro de cage. Pour injecter l’immunoconjugué, prélevez des doses de 150 microlitres de solution huA33-TCO dans des seringues prétraitées avec de l’albumine sérique bovine à 1 % dans du PBS, et conservez ces seringues sur de la glace. Pour injecter le radioligand, prélevez d’abord des doses dans 150 microlitres de solution saline stérile à 0,9 % contenant 1,1 équivalence molaire du Tz-PEG7-DOTA radiomarqué par rapport à la quantité de huA33-TCO administrée.

Utilisez des pieds à coulisse pour mesurer le côté le plus long de la tumeur oblongue ainsi que la largeur, qui est perpendiculaire à la longueur. Pesez chaque souris sur une balance pour suivre le gain ou la perte de poids au fil du temps. Enfin, calculez le volume à l’aide de la formule du volume d’un ellipsoïde, en supposant que la hauteur est approximativement égale à la largeur.