Modèles murins de métastases spontanées : une plateforme pour étudier le potentiel métastatique des cellules cancéreuses colorectales injectées orthotopiquement
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0 vues • 2:57 min • April 30th, 2023
- Commencez par une culture de protéine fluorescente verte, ou GFP, exprimant les organoïdes du cancer colorectal. Récoltez les organoïdes. Traiter avec une solution enzymatique de décollement cellulaire pour dissocier les organoïdes en une suspension unicellulaire. Centrifugeuse pour séparer le surnageant contenant des enzymes. Retirez le surnageant. Remettre en suspension les cellules cancéreuses colorectales exprimant la GFP à l’aide d’un milieu artificiel contenant une matrice extracellulaire. Chargez la suspension cellulaire dans une seringue et maintenez-la sur de la glace pour éviter la solidification de la matrice à température ambiante.
Ensuite, préparez une souris anesthésiée en position couchée. Retirez doucement la muqueuse du rectum par l’ouverture anale. Maintenant, injectez la suspension de cellules cancéreuses exprimant la GFP préparée dans la couche sous-muqueuse rectale contenant le réseau de vaisseaux sanguins. Laissez la souris récupérer.
En quelques jours, une tumeur primaire exprimant la GFP se développe au site d’injection. Avec les métastases spontanées, ces cellules tumorales se détachent et entrent dans la circulation. Finalement, les cellules extravasent
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