Modèle de résection iléale murine : étude du métabolisme biliaire induit par l’iléectomie dans un modèle murin
JoVE Encyclopedia of Experiments
Recherche sur le cancer
0 vues • 4:35 min • April 30th, 2023
- La circulation entérohépatique des acides biliaires, ou BA, maintient son homéostasie dans le corps. Les cellules hépatiques ou hépatocytes produisent des BA à partir desquels ils se déplacent vers l’iléon et sont activement transportés à l’intérieur des cellules intestinales ou des iléocytes. À l’intérieur des iléocytes, les BA activent la synthèse de l’hormone du facteur de croissance des fibroblastes, ou FGF. Le FGF est retransposé au foie par la veine porte hépatique et se lie aux récepteurs des hépatocytes, envoyant ainsi un signal de rétroaction négative en aval pour arrêter la production de BA.
La résection iléale est une stratégie de traitement courante du cancer du côlon. Par conséquent, nous préparons un modèle de résection iléale murine pour mieux comprendre le rôle de l'iléon dans le cancer du côlon.
Commencez par placer une souris anesthésiée sur une planche de dissection et faites une incision abdominale médiane. Ensuite, exposez l’iléon et réséquez le segment iléal sélectionné et suturez les extrémités iléales ensemble. Enfin, renvoyez l’intestin anastomotique dans la cavité abdominale et suturez ensemble le muscle incisé et la couche cutanée.
Laissez la souris récupérer et analysez les effets de l’ablation de l’iléon, ce qui peut provoquer une suraccumulation de bile dans les intestins. Dans le protocole suivant, nous préparerons un modèle de résection iléale murine pour étudier les effets de l’hormone FGF iléale sur le métabolisme de la bile.
- Commencez par confirmer le niveau approprié de sédation par pincement des orteils et appliquez une crème dépilatoire sur l'abdomen de la souris. Retirez les poils à l’aide d’éponges chirurgicales et placez l’animal sur une table chirurgicale pour petits animaux à température contrôlée réglée à 37 degrés Celsius. Appliquez la pommade sur les yeux de l'animal et désinfectez la peau exposée avec un gommage séquentiel à la povidone iodée et à l'éthanol à 70 %.
Couvrez la zone chirurgicale de l’abdomen avec de la gaze chirurgicale stérile et utilisez un scalpel pour faire une incision médiane dans l’abdomen et couper à travers la couche musculaire. À l’aide d’un applicateur à embout de coton pour protéger les intestins, ouvrez complètement les muscles abdominaux de la souris avec des écarteurs pour exposer la cavité abdominale.
En partant du cæcum, déplacez avec précaution l’iléon connecté et une partie du jéjunum hors de la cavité abdominale et utilisez une suture en soie 7-0 pour ligaturer la branche supérieure de l’artère mésentérique supérieure. Lorsque la couleur du tissu passe du rose au foncé, indiquant une occlusion complète, utilisez des ciseaux pour exciser 50 % ou 90 % de l’iléon, selon les paramètres de l’expérience.
Rincer la lumière des deux extrémités iléales avec une solution saline à 0,9 %. Après avoir localisé le mésentère sur le côté des deux extrémités iléales, alignez les mésentères sur les deux extrémités du tissu excisé et utilisez un 8-0 suture pour joindre les extrémités ensemble. Suturez le côté controlatéral de l’iléon pour maintenir l’iléon anastomosé de manière naturelle et suturez les côtés supérieur et inférieur entre les deux sutures d’origine pour joindre complètement les deux extrémités iléales.
Après avoir confirmé l’absence de fuite du site d’anastomose, remettez le caecum et l’intestin grêle à leurs emplacements anatomiques d’origine et utilisez une aiguille émoussée pour laver la zone chirurgicale avec une solution saline chaude à 0,9 %. Fermez la couche musculaire abdominale avec une suture 6-0 et alignez l’incision cutanée abdominale pour fermer la peau et faciliter une cicatrisation optimale des plaies.
Ensuite, transférez la souris dans une unité de soins intensifs dans une cage de litière en papier sur un coussin chauffant à température contrôlée pour une récupération nocturne avec de la nourriture molle en plus de la nourriture et de l’eau ordinaires.
Aperçu
Cette étude examine la circulation entérohépatique des acides biliaires et son rôle dans le cancer du côlon à l'aide d'un modèle murin de résection iléale. La recherche s'intéresse aux effets de l'ablation de l'iléon sur le métabolisme biliaire et la synthèse du facteur de croissance des fibroblastes (FGF).
Composantes clés de l'étude
Domaine scientifique
- Neurosciences
- Biologie
- Gastro-entérologie
Contexte
- La circulation entérohépatique est cruciale pour l'homéostasie des acides biliaires.
- Le FGF joue un rôle important dans la régulation de la production des acides biliaires.
- La résection iléale est un traitement courant du cancer du côlon.
- Comprendre le rôle de l'iléon peut fournir des informations sur le métabolisme biliaire.
Objectif de l'étude
- Préparer un modèle murin de résection iléale.
- Analyser l'impact de l'ablation de l'iléon sur l'accumulation des acides biliaires.
- Étudier le rôle du FGF dans le métabolisme des acides biliaires après résection.
Méthodes utilisées
- Anesthésier la souris et préparer le site chirurgical.
- Réaliser une incision abdominale médiane pour accéder à l'iléon.
- Résecter un segment de l'iléon et suturer les extrémités ensemble.
- Surveiller la récupération et analyser les effets métaboliques après la chirurgie.
Résultats principaux
- Une résection iléale réussie a été réalisée sur le modèle murin.
- L'analyse postopératoire a révélé une suraccumulation de la bile.
- Les niveaux de FGF ont été affectés par l'ablation de l'iléon.
- Des informations sur le métabolisme de la bile ont été obtenues grâce à ce modèle.
Conclusions
- Le modèle de résection iléale murine est efficace pour l'étude du métabolisme des sels biliaires.
- Le FGF joue un rôle essentiel dans la régulation rétroactive des acides biliaires.
- Des recherches supplémentaires sont nécessaires pour explorer les implications thérapeutiques dans le cancer du côlon.
Questions fréquemment posées
Pertinence professionnelle pour l'industrie
La compréhension des effets de la résection iléale sur le métabolisme des acides biliaires fournit des éclairages mécanistiques pertinents concernant la toxicité gastro-intestinale et les stratégies thérapeutiques contre le cancer du côlon. Ce modèle murin permet une évaluation préclinique de l'accumulation excessive de bile et de la perturbation de la signalisation FGF, soutenant ainsi la validation de cibles dans la modulation de la voie entérohépatique. Cette approche contribue à réduire les risques liés aux hypothèses associant la résection intestinale à un déséquilibre métabolique dans les contextes oncologiques.
Applications stratégiques en recherche et développement en biopharmaceutique
Début de la découverte et validation de la cible
- Valeur scientifique : Étudie le rôle de l’iléon dans l’homéostasie des acides biliaires et la régulation par rétrocontrôle médiée par les FGF.
- Valeur opérationnelle : Permet la validation fonctionnelle de cibles intestinales impliquées dans le transport et le métabolisme des acides biliaires.
- Valeur prédictive : Facilite l’évaluation des effets de la modulation de cibles sur l’accumulation excessive d’acides biliaires et la toxicité épithéliale.
Développement de tests et criblage
- Prêt pour les tests : Génère des modèles de tissus pertinents pour la maladie afin de quantifier les niveaux d'acides biliaires et les lésions intestinales.
- Production quantitative : Facilite la mesure de l'accumulation excessive de bile comme indicateur pharmacodynamique.
- Reproductibilité : Une procédure chirurgicale standardisée permet une génération cohérente du modèle dans différentes études.
Recherche translationnelle et préclinique
- Pertinence pour la maladie : Modélise la malabsorption biliaire induite par iléectomie observée chez les patients subissant une chirurgie gastro-intestinale.
- Continuité translationnelle : Établit un lien entre la perturbation de la signalisation FGF et les altérations du métabolisme biliaire dans l'intestin de la souris.
- Évaluation des risques : Approfondit la compréhension mécanistique de la toxicité intestinale après une résection.
- Utilité préclinique : Permet d'évaluer des interventions ciblant l'homéostasie des acides biliaires ou les voies FGF.
Intégration des pipelines et des flux de travail
Le modèle s'intègre aux flux de travail de découverte en fournissant un système biologiquement pertinent pour étudier les conséquences d'une résection intestinale sur la signalisation métabolique, en particulier dans le cadre des soins de support en oncologie et de l'évaluation de la sécurité gastro-intestinale.
- Biologie de la découverte : Teste les hypothèses concernant la synthèse intestinale de FGF et son rôle de rétrocontrôle hépatique dans la régulation des acides biliaires.
- Analytique : Permet la quantification de l'accumulation des acides biliaires et de l'histologie intestinale comme paramètres métaboliques clés.
- Recherche translationnelle : Établit un lien entre la résection iléale chez la souris et les perturbations du métabolisme biliaire pertinentes pour l'humain après une chirurgie.
- Réutilisation en entreprise : Met en place un modèle chirurgical réutilisable pour étudier les effets de l'ablation de segments intestinaux dans divers domaines thérapeutiques.
Impact opérationnel et organisationnel
- Valeur scientifique : Fournit des éclairages mécanistiques sur la dysrégulation des acides biliaires et la perte de la signalisation FGF après la résection.
- Valeur opérationnelle : Offre un modèle standardisé et reproductible pour les études de résection intestinale.
- Valeur stratégique : Éclaire les décisions d'avancement ou d'abandon en révélant les conséquences métaboliques intestinales spécifiques au site d'action.
- Impact sur le portefeuille : Soutient la progression ajustée au risque en identifiant précocement les mécanismes de toxicité médiés par les acides biliaires.
Considérations relatives à la mise en œuvre
- Nécessite une expertise en techniques chirurgicales murines et en anastomose intestinale.
- Dépend d'une infrastructure chirurgicale stérile et de capacités de surveillance postopératoire.
- Exige des protocoles standardisés pour l'étendue de la résection iléale et la manipulation des tissus.
- Implique une coordination pluridisciplinaire entre les équipes de chirurgie, de métabolisme et d'histologie.
- Limité à la physiologie murine ; les différences entre espèces en ce qui concerne la cinétique des acides biliaires doivent être prises en compte.
F.A.Q. sur la bio-industrie pharmaceutique
En utilisant des acides biliaires multi-fluorés et
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Dernière mise à jour : 29 août 2026