Infection adéno-crétique segmentaire : une technique pour générer un cancer colorectal isolé à l’aide de modèles de souris génétiquement modifiées

- Commencez par prendre une souris mutante conditionnelle anesthésiée avec un génome modifié portant des séquences spécifiques de reconnaissance de l’enzyme Cre-recombinase appelées inserts LoxP qui flanquent le gène suppresseur de tumeur à muter. Exposer chirurgicalement la cavité abdominale. Localisez le côlon distal et clampez sa partie supérieure. Insérez par voie transanale un tube de qualité médicale et faites-le avancer dans le côlon distal. Rincez le côlon avec une solution saline pour éliminer toute matière fécale. Replacez le tube. Clamp la région inférieure du côlon pour la segmentation. Gonflez le segment à l’aide d’une solution de dissociation cellulaire adaptée. Cela perfore la barrière muqueuse et augmente l’accessibilité des cellules de la crypte intestinale. Rincez la solution de dissociation.

Ensuite, injectez une suspension adénovirale dans le segment du côlon. Ces vecteurs viraux modifiés codent pour les enzymes Cre-recombinase. Le virus pénètre dans la cellule, libère son ADN dans le noyau et exprime les enzymes. Les protéines reconnaissent les inserts LoxP dans le génome de l’hôte et catalysent la recombinaison spécifique du site, inactivant ainsi le gène supp