Dosage de la cytométrie de traction : une méthode pour quantifier la force de traction exercée par les cellules cancéreuses sur l’ECM

- Les cellules génèrent des forces mécaniques qui agissent sur une matrice extracellulaire. Cette force est appelée force de traction. Les cellules exercent des forces de traction pour effectuer diverses tâches telles que la migration et la prolifération.

Les cellules cancéreuses métastatiques exercent des forces de traction plus importantes que les cellules saines ; par conséquent, nous effectuons un test de cytométrie de traction pour mesurer les forces de traction exercées par les cellules sur des substrats élastiques. Commencez par ensemencer la quantité souhaitée de cellules cancéreuses du côlon sur un hydrogel de polyacrylamide, un gel qui imite la MEC in vitro. Le gel comprend des protéines de fibronectine, qui aident les cellules à adhérer à la surface, et des billes fluorescentes, qui agissent comme un marqueur des changements de position.

Incuber les cellules pendant la période souhaitée. Les cellules adhèrent au gel et exercent la force de traction, ce qui provoque le déplacement des billes fluorescentes. Maintenant, placez la plaque sous un microscope fluorescent et prenez une image des billes fluorescentes déplacées. Ensuite, ajoutez la quantité souhaitée de trypsine d