Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 3:02 min • April 30th, 2023
- Dans les modèles expérimentaux de souris cancéreuses, le cancer induit chez l’animal ressemble au cancer humain en termes de phénotype. Ils fournissent une plate-forme efficace pour évaluer l’efficacité des thérapies potentielles. Pour induire un modèle de cancérogenèse cutanée en deux étapes, il faut d’abord préparer une souris anesthésiée immunodéprimée en position couchée. Rasez sa fourrure pour exposer la peau sous-jacente. Dans un premier temps, appliquez un puissant agent initiateur de tumeur sur la peau dorsale exposée.
Ces follicules pileux, dans leur phase de repos ou télogène, abritent des glandes sébacées inactives. Le manque de flux de sébum qui en résulte permet l’accumulation du composé dans ces follicules pileux. Le composé se diffuse dans les cellules environnantes et induit une mutation génétique cible, principalement dans les cellules souches du follicule pileux ou les cellules souches kératinocytaires primaires. L’expression génique altérée provoque l’initiation de la tumeur dans ces cellules.
Dans un deuxième temps, appliquez à plusieurs reprises un agent favorisant la croissance tumorale approprié sur la peau dorsale pendant les intervalles de temps souhaités. Le produit chimique stimule l’expansion de la population cellulaire initiée. La prolifération cellulaire continue conduit à la formation d’excroissances cancérigènes appelées papillomes.
Dans le protocole suivant, nous montrons la génération d’un modèle murin de cancérogenèse cutanée en deux étapes à l’aide des produits chimiques DMBA, un mutagène, et TPA, un agent favorisant la croissance.
- Avant de commencer l’expérience, logez les souris agressives de 7 à 9 semaines dans des cages séparées pour éviter les bagarres et les lésions cutanées. Pour l’induction du papillome cutané, rasez d’abord la peau du dos des animaux de laboratoire et pesez les souris individuellement. Quarante-huit heures après le rasage, à l’aide d’une pipette, appliquez 50 microgrammes de DMBA dans 200 microlitres d’acétone sur la zone rasée de chaque souris anesthésiée.
Pour la promotion du papillome cutané, sept jours après l’application du DMBA, traitez la peau avec 5 microgrammes de TPA dans 200 microlitres d’acétone, deux fois par semaine jusqu’à la fin de l’expérience. Examinez les animaux à la recherche de papillomes et photographiez et notez la taille de chaque papillome sur une carte, chaque semaine.
Une masse palpable de plus de 1 millimètre de diamètre est considérée comme un papillome si elle persiste plus d’une semaine.