Préparation du virion du polyomavirus à cellules de Merkel recombinante (MCPyV) : une technique pour produire un virion MCPyV recombinant à titre élevé

- Le polyomavirus à cellules de Merkel, ou MCPyV, est un oncovirus à ADN double brin avec un génome circulaire qui provoque le carcinome à cellules de Merkel, un type de cancer de la peau. Pour préparer les virions MCPyV, il faut d’abord traiter une culture adhérente de cellules d’emballage avec un cocktail contenant un agent de transfection, le génome viral et deux plasmides d’expression codant pour des protéines nécessaires à la promotion de la réplication virale.

Pendant l’incubation, le réactif de transfection forme des lypoplexes avec les plasmides, facilitant leur livraison dans les cellules d’emballage. Une fois à l’intérieur du noyau, la machinerie cellulaire permet l’expression des génomes viral et plasmidique. Les plasmides d’expression codent pour les protéines de l’antigène de la grande tumeur et de l’antigène de la petite tumeur. Ces protéines se déplacent vers le noyau et entraînent la réplication de l’ADN viral. Par la suite, le génome viral code pour des protéines de capside structurelle. Ces protéines se déplacent dans le noyau et aident à l’assemblage des virions recombinants.

Ensuite, récoltez les cellules cultivées. Traitez-les avec une solution contenant du dét