Évaluation de la dégénérescence neuronale dans des sections de cerveau de souris à l’aide de la coloration à l’argent

Commencez par un plateau de coloration contenant des sections de tissu cérébral de souris fixes présentant une dégénérescence neuronale.

Ajoutez de l’eau distillée deux fois pour laver les sections.

Placez les sections dans une solution de nitrate d’argent et incuberez.

Les ions d’argent se lient sélectivement aux neurones en dégénérescence.

Plongez les sections dans de l’acétone pour les déshydrater, puis traitez-les avec une solution d’argent alcaline pour stabiliser les dépôts d’argent.

Incuber les sections dans une solution de mélange réducteur pour convertir les ions d’argent liés en dépôts d’argent métallique.

Rincer à l’acide acétique pour arrêter la réaction.

Cela met en évidence les neurones en dégénérescence contre les neurones sains non colorés.

Placez les sections dans un agent de blanchiment doux pour éliminer l’argent de fond, puis rincez à l’eau doublement distillée.

Ensuite, immergez-le brièvement dans un agent de blanchiment puissant pour éliminer les dépôts d’argent persistants de l’arrière-plan.

Ajouter un réactif stabilisant pour stabiliser les dépôts d’argent sur les neurones, puis rincer à l’eau distillée doublement. Enfin, traitez avec un fixateur pour fixer définitivement la tache.

Les régions colorées plus foncées indiquent une dégénérescence neuronale.