JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurosciences
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Commencez par une lame de verre contenant une section de tissu cérébral incrustée de paraffine provenant d’un chien âgé.
Le tissu présente des fibrilles amyloïdes et des agrégats de protéines anormaux dans les parois des vaisseaux cérébraux, qui sont des indicateurs clés de troubles neurologiques.
Trempez la lame dans du xylène pour éliminer la paraffine, suivie d’un lavage à l’alcool pour éliminer le xylène.
Ensuite, immergez séquentiellement la lame dans la concentration décroissante d’alcool. Ce processus hydrate la section de tissu et améliore sa perméabilité pour la coloration.
Appliquez le colorant rouge Congo, qui se lie avec une grande affinité à la structure bêta-feuillet des fibrilles amyloïdes, fournissant une couleur rouge distincte.
Rincez la section à l’eau pour enlever les colorants non liés.
Enfin, appliquez la coloration de base à l’hématoxyline, qui colore sélectivement les noyaux cellulaires en bleu. Laver pour enlever l’excès de tache.
Au microscope, des régions denses et colorées en rouge dans les parois des vaisseaux cérébraux confirment la présence de fibrilles amyloïdes, caractéristiques de l’angiopathie amyloïde cérébrale.