Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 1:21 min • March 4th, 2025
Prenez une section de tissu cérébral d’une souris soumise à une légère hypoperfusion cérébrale chronique, ou MCCH, et injectez-lui des peptides bêta-amyloïdes.
La MCCH se caractérise par une réduction du flux sanguin vers le cerveau. Cela limite l’apport d’oxygène et de nutriments à la couche de cellules endothéliales des vaisseaux sanguins cérébraux, endommageant les cellules.
Les dommages augmentent la perméabilité de la paroi vasculaire, ce qui permet aux peptides bêta-amyloïdes injectés de s’accumuler dans la paroi et de former des plaques.
Lavez la section avec un tampon pour éliminer les produits chimiques résiduels.
Incuber avec de la thioflavine S, un colorant fluorescent qui se lie aux plaques amyloïdes.
Lavez la section tachée avec des concentrations d’alcool décroissantes pour éliminer tout colorant non lié et réhydrater les tissus.
Placez la section dans le tampon pour maintenir l’hydratation.
Montez la section à l'aide d'un support de montage qui préserve l'intensité de fluorescence du colorant.
À l’aide d’un microscope à fluorescence, examinez la présence de dépôts amyloïdes marqués par fluorescence pour confirmer l’agrégation de la bêta-amyloïde induite par MCCH.