Coloration à l'argent d'enchevêtrements neurofibrillaires dans des sections de cerveau à partir d'un modèle murin de la maladie d'Alzheimer

Prenez des sections de cerveau fixées chimiquement obtenues à partir d'un modèle murin femelle de la maladie d'Alzheimer.

Ces sections contiennent des enchevêtrements neurofibrillaires, des agrégats anormaux de protéine tau présents dans les neurones de l’hippocampe.

Lavez les sections avec un tampon, puis de l’eau déminéralisée.

Traiter avec de l’acide périodique pour oxyder les groupes glycosyles associés aux agrégats, formant des groupes aldéhydes.

Laver à l’eau déminéralisée et ajouter une solution alcaline d’iodure d’argent. Les ions argent forment des complexes avec les aldéhydes, créant des sites de nucléation.

Laver avec un acide faible dilué pour éliminer l’argent non lié et neutraliser le pH.

Rincer à l’eau déminéralisée.

Ajoutez une solution de révélateur réfrigérée contenant un agent réducteur pour convertir les ions argent en argent métallique, produisant une couleur brun pâle.

Rincer avec un acide faible dilué pour stopper le développement.

Montez les sections, déshydratez-les en augmentant les concentrations d’alcool et appliquez un support de montage.

Scellez les sections avec une lamelle.

À l’aide d’un microscope optique, visualisez les enchevêtrements neurofibrillaires.