Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 1:17 min • March 4th, 2025
Le sulfate d'héparane, un glycosaminoglycane, est présent dans les plaques amyloïdes associées à la maladie d'Alzheimer.
Pour visualiser l’héparane sulfate, commencez par une coupe de tissu hippocampique humain malade contenant des plaques amyloïdes.
Fixez la section de tissu à l’aide d’un fixateur pour préserver les structures cellulaires.
Ensuite, traitez le tissu avec un agent bloquant pour empêcher la liaison d’anticorps non spécifiques.
Ajoutez un détergent non ionique pour perméabiliser les membranes cellulaires.
Incuber le tissu avec des anticorps primaires qui ciblent spécifiquement le sulfate d’héparane dans les plaques amyloïdes.
Laver les anticorps primaires non liés.
Ensuite, ajoutez des anticorps secondaires conjugués aux fluorophores, qui se lient aux anticorps primaires attachés au sulfate d’héparane.
Retirez tous les anticorps non liés.
Teindre les noyaux à l’aide d’un colorant fluorescent.
Enfin, utilisez un microscope à fluorescence pour visualiser le sulfate d’héparane marqué par fluorescence dans les plaques amyloïdes et les noyaux de couleur bleue dans la coupe du tissu malade.