Une technique de coloration à l’or pour visualiser la réduction de la myéline chez des souris stressées

Prenez un cerveau chimiquement fixé d’une souris soumise à un stress chronique.

Le stress altère la fonction des oligodendrocytes, perturbant la gaine de myéline riche en lipides entourant les axones neuronaux du cortex préfrontal médian, une région du cerveau régulant les émotions.

Réappliquez le fixateur pour préserver l’architecture des tissus. Immergez le tissu dans un cryoprotecteur pour remplacer l’eau, empêchant ainsi la formation de cristaux de glace pendant la congélation.

Congelez le cerveau, puis coupez-le en tranches coronales.

Montez les tranches sur des lames, puis réhydratez-les dans de l’eau pour améliorer la pénétration de la tache.

Faites chauffer les tranches dans une solution contenant des ions or. Ces ions se lient sélectivement aux lipides de la gaine de myéline et forment des dépôts d’or métallique, marquant les neurones myélinisés.

Chauffer avec un agent réducteur pour réduire l’excès d’ions d’or, puis rincer pour les éliminer et déshydrater les tissus en augmentant les concentrations d’alcool.

Utilisez du xylène pour augmenter la transparence des tissus et montez les lames.

À l’aide de la microscopie, visualisez les neurones myélinisés colorés d’or et évaluez les changements induits par le stress.