Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:24 min • August 29th, 2025
Commencez avec une souris anesthésiée sur un cadre stéréotaxique avec la tête inclinée.
Une incision du cuir chevelu chez la souris expose la dure-mère recouvrant la citerne magna, un liquide céphalo-rachidien ou un espace rempli de LCR entre le cervelet et le tronc cérébral.
À l’aide d’une pince, saisissez la dure-mère et créez-y une petite ouverture pour accéder à la citerne magna.
Utilisez un écouvillon stérile pour enlever l’excès de LCR.
Identifiez le point de référence anatomique où la moelle épinière se connecte au tronc cérébral, puis déterminez les coordonnées stéréotaxiques.
Abaissez le bras stéréotaxique qui tient la micropipette, qui contient la solution thérapeutique.
Faites avancer la micropipette à travers la citerne magna dans le tronc cérébral aux coordonnées prédéterminées.
Injectez la solution lentement et tenez la pipette brièvement pour éviter le reflux.
La solution thérapeutique atteint directement les régions du tronc cérébral et de la moelle épinière supérieure, qui sont difficiles à atteindre avec les méthodes stéréotaxiques standard.
Observez la surface dorsale du tronc cérébral avec des repères détaillés à travers la dure-mère ouverte.
À l’aide de la pince coudée, saisissez la dure-mère s’étendant de l’os occipital à l’atlas, puis utilisez les ciseaux à ressort pour faire une petite ouverture d’environ 0,5 à 1,5 millimètre dans la dure-mère. Une fois la dure-mère ouverte, drainez l’excès de liquide céphalo-rachidien à l’aide d’un coton-tige stérile. L’obex, le point où le canal central s’ouvre dans le quatrième ventricule, est le point zéro standard antéro-postérieur et médiolatéral.
Positionnez la pipette ou la seringue sur la cible à l’aide du bras stéréotaxique. Abaissez le bras de la dorsale sur la surface dorsale qui se forme à partir du point zéro dorso-ventral. Abaissez ensuite la pipette sur le tronc cérébral et injectez la solution.
Laissez l’aiguille en place pendant une à cinq minutes après l’injection pour éviter une trace d’aiguille lors de l’utilisation de volumes compris entre 3 et 50 nanolitres. Soulevez ensuite la pipette ou la seringue à l’aide du bras stéréotaxique et répétez l’opération pour plusieurs cibles.