Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 1:44 min • August 29th, 2025
Commencer avec des cellules de phéochromocytome 12 ou PC12 de rat dans un milieu de croissance basique.
Prenez un puits enrobé de collagène contenant un milieu de différenciation et placez-y les cellules.
Incuber pour faciliter l’adhésion cellulaire.
Prenez un film de silicium poreux nanostructuré dégradable ou PSi.
Les pores du film sont chargés de facteur de croissance nerveuse ou NGF, qui est adsorbé par des interactions électrostatiques entre le NGF chargé négativement et la surface PSi chargée positivement.
Placez le film PSi chargé de NGF à l’intérieur du puits et incuber.
Changez de support à intervalles réguliers.
Le NGF contenu dans le film PSi est libéré dans le milieu par diffusion et lorsque l’échafaudage en silicium se dégrade.
Ce système d’administration permet une libération prolongée de NGF à un taux contrôlé sur une longue période.
Les NGF interagissent avec la cellule PC12, ce qui permet sa survie et facilite la croissance et la ramification des neurites.
Grainez une fois 10 à la quatrième cellules par centimètre carré de surface de travail sur des plaques revêtues de type colligen en présence d’un milieu de différenciation. Placez les plaques dans l’incubateur.
Après 24 heures à 37 degrés Celsius, ajoutez du bêta-NGF murin frais ou un support de silicium poreux chargé de NGF dans chaque plaque et remettez les plaques dans l’incubateur.