Transplantation de cellules progénitrices neurales humaines dans le cerveau de souris

Fixez une souris anesthésiée dans un cadre stéréotaxique.

Appliquez une pommade oculaire pour prévenir le dessèchement de la cornée.

Rasez le cuir chevelu et désinfectez la peau.

Insérez les barres d’oreille pour stabiliser le crâne.

Ensuite, faites une incision médiane pour exposer le crâne.

Percez un trou dans le crâne à la coordonnée cible.

Chargez une seringue avec des cellules progénitrices neurales humaines génétiquement modifiées ou des NPC exprimant la luciférase et une protéine fluorescente pour la visualisation.

Alignez la seringue avec le site cible et abaissez l’aiguille à la profondeur souhaitée.

Appliquez de l’adhésif tissulaire autour de l’aiguille pour éviter les fuites cellulaires.

Injectez les cellules lentement pour assurer une distribution uniforme.

Maintenez brièvement l’aiguille en place pour éviter le reflux de la suspension cellulaire.

Enfin, retirez lentement l’aiguille et fermez l’incision.

Le modèle de souris avec des PNJ transplantés est maintenant prêt à être visualisé.

Transporter l’animal de la chambre d’induction au cadre stéréotaxique, en maintenant l’anesthésie à l’aide d’un masque facial.

Appliquez un lubrifiant ophtalmique pour éviter que les yeux ne se dessèchent. Rasez le cuir chevelu de la souris avec un rasoir électrique et désinfectez la peau avec une solution de bétadine à 5 % à l’aide de cotons-tiges. Fixez la tête de la souris et insérez les barres d’oreille dans le méat externe.

Percez un trou d’un diamètre de deux à trois millimètres à travers le crâne avec une perceuse dentaire chirurgicale. Remettez en suspension les cellules préparées dans le tube et aspirez deux microlitres de suspension cellulaire dans une seringue. Placez la seringue au-dessus du site cible et déplacez lentement l’aiguille vers la surface de la dure-mère et calculez les coordonnées de profondeur.