Administration de médicaments ophtalmiques pour la neuromodulation non invasive dans un modèle murin

Commençons par une souris génétiquement modifiée dont les neurones de l’hippocampe expriment des récepteurs de synthèse exclusivement activés par des drogues de synthèse ou des DREADD.

Ces récepteurs modifiés répondent sélectivement aux médicaments d’essai synthétiques tout en restant insensibles aux molécules endogènes.

Ébouriffez régulièrement la souris pour minimiser le stress et acclimatez-la à la procédure.

Ensuite, pesez la souris pour calculer le dosage correct du médicament.

Lors de la manipulation de la souris, utilisez une lumière rouge tamisée pour éviter les perturbations circadiennes.

Ébouriffez doucement la souris pour l’immobiliser.

À l’aide d’une pipette, prélever la solution de médicament d’essai et former une gouttelette à l’extrémité. Maintenant, approchez-vous de l’œil

et libérez la gouttelette à sa surface.

Remettez la souris dans sa cage d’origine. Répétez l’administration du médicament plusieurs fois.

Le médicament est absorbé par l’œil et pénètre dans le cerveau.

Il traverse ensuite la barrière hémato-encéphalique et atteint la région de l’hippocampe. Plus tard, il se lie aux récepteurs DREADD et active les neurones, permettant une neuromodulation précise et non invasive.

Pour l’accouchement répétitif de CNO, à partir de quatre semaines après l’injection, acclimatez les animaux à la manipulation en ébouriffant chaque souris trois minutes par jour pendant trois à quatre jours avant l’administration des gouttes ophtalmiques. Lorsque les souris se sont acclimatées à la manipulation, pesez chaque souris pour déterminer la quantité appropriée de CNO à délivrer pour obtenir une concentration d’un milligramme de CNO par kilogramme de concentration de poids corporel.

Deux heures avant que les lumières ne s’éteignent pendant la phase d’inactivité, chargez un à trois microlitres de la solution CNO préparée dans une micropipette P10 et immobilisez la souris par écaillage. Expulsez lentement la solution jusqu’à ce qu’une gouttelette stable se forme sur l’extrémité de la pipette et rapprochez délicatement la gouttelette de la cornée jusqu’à ce que la solution soit administrée sans toucher la pointe de la pipette à l’œil de la souris. Remettez ensuite la souris dans sa cage d’accueil avant d’appliquer le collyre CNO sur l’œil de l’animal suivant.

Dans les cas où la CNO doit être administrée pendant la phase active de la souris, assurez-vous de la présence d’une lumière rouge tamisée pour une manipulation correcte de l’animal et la livraison de la CNO.