Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:40 min • August 29th, 2025
Commençons par le nerf sciatique isolé d’une souris.
Les neurones du nerf ont été transfectés pour exprimer des protéines cytoplasmiques fluorescentes.
Le nerf a été écrasé pour induire une blessure, qui a été marquée par une suture.
Les segments axonaux blessés sur le site dégénèrent et les macrophages recrutés éliminent les débris.
Les cellules de Schwann prolifèrent pour former des pistes de guidage et sécrètent des facteurs neurotrophiques qui favorisent la repousse des axones. Les axones s’étendent le long de ces pistes, régénérant le nerf.
Fixez le nerf pour préserver les structures cellulaires, puis retirez tous les tissus non neuronaux attachés.
Laver avec un tampon pour éliminer les fixateurs résiduels.
Positionnez le nerf sur une lame de microscope, appliquez un support de montage et placez une lamelle.
Aplatissez le nerf pour positionner les axones dans le même plan focal pour l’imagerie.
À l’aide d’un microscope à épifluorescence, tracez les axones du site d’écrasement à leurs extrémités distales pour
mesurer la longueur de régénération.
Séparez soigneusement les DRG avec les racines nerveuses et le nerf sciatique, avec des micro-ciseaux et des micro-pinces sous le microscope de d
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