Transduction virale in utero chez une souris
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:13 min • August 29th, 2025
Prenez un mélange de virus contenant un gène souhaité pour la transduction et un colorant de suivi dans un tampon.
Aspirez le mélange virus-colorant dans un capillaire à pointe fine.
Prenez une souris enceinte anesthésiée avec une région abdominale rasée.
Désinfectez la peau avec de l’éthanol, suivi d’une solution de bétadine.
Faites une incision médiane pour exposer la cavité abdominale et placez un film de paraffine dessus.
Exposez les cornes utérines et versez un tampon dessus pour éviter la sécheresse.
Notez l’ordre et la position des embryons. Ajustez la position de l’embryon dans le sac utérin pour accéder aux sites d’injection.
Injectez le mélange virus-colorant dans la moelle épinière et les ventricules cérébraux.
Assurez une injection précise en visualisant la distribution du colorant.
Remettez les cornes utérines dans la cavité abdominale et versez un peu de tampon.
Suturez la cavité abdominale, puis la peau.
Le virus injecté pénètre dans la cellule hôte, libérant le gène cible et permettant son expression.
Commencez par charger un embout capillaire personnalisé contenant quatre fois 10 à 11 particules virales d’enrobage viral de virus adéno-associé de type 1 pour la cible souhaitée,
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