Injection stéréotaxique d’hydrogel dans un modèle murin post-AVC

Fixez une souris anesthésiée après un AVC sur un cadre stéréotaxique.

Rouvrez l’incision du cuir chevelu et nettoyez le crâne exposé avec du coton imbibé de solution saline.

Identifiez le noyau nécrotique blanc-jaune dans le tissu cérébral et un trou de bavure qui confirme le site de l’AVC.

Ce noyau nécrotique contient des neurones endommagés et un système vasculaire non fonctionnel.

Fixez une seringue microporeuse chargée de particules d’hydrogel à la pompe et réglez les coordonnées d’injection.

Abaissez la seringue au-dessus du trou de la bavure, puis insérez-la dans le site de la course.

Injectez l’hydrogel à un débit contrôlé pour assurer une diffusion progressive sans lésions du tissu cérébral.

Incuber pour permettre à l’hydrogel de se réticuler, formant un échafaudage de biomatériau.

Rétractez lentement la seringue, en assurant la rétention d’hydrogel sans fuite.

Fermez l’incision avec de la colle chirurgicale et remettez la souris dans sa cage.

L’échafaudage de l’hydrogel imite la matrice extracellulaire, induisant une infiltration cellulaire et la formation de nouveaux vaisseaux sanguins, indiquant le potentiel de l’hydrogel dans les neurothérapies.

Rouvrez l’incision sur le cerveau et utilisez du coton imbibé de solution saline pour nettoyer tous les débris du crâne.

Un cercle de tissu blanc et jaune et le trou de bavure de la perceuse seront visibles. Verrouillez la pompe d’injection à 90 degrés sur la souris.

Chargez la seringue sur la pompe et déplacez la pompe dans les directions X et Y pour orienter la seringue sur le trou de la bavure. Déplacez la pompe dans la direction Z jusqu’à ce que l’aiguille touche le haut du trou.

Et réinitialisez le Z sur la console d’affichage numérique. Déplacez la seringue de 0,75 millimètre dans la direction Z et appuyez sur le bouton de démarrage sur la console de la pompe pour injecter quatre à six microlitres d’hydrogel à un débit d’un microlitre par minute. Lorsque tout l’hydrogel a été distribué, réglez une minuterie de cinq minutes pour permettre au gel de commencer la réticulation.

Au bout de cinq minutes, tournez le bouton Z pour tirer lentement la seringue vers le haut. Lorsque l’aiguille est suffisamment éloignée du crâne, déverrouillez et retirez la pompe. Ensuite, refermez la peau du crâne et placez la souris dans une cage propre avec surveillance jusqu’à ce qu’elle se remette de l’anesthésie.