Implantation d’une canule dans la citerne magna dans un modèle murin

Commencez avec une souris anesthésiée placée dans un cadre stéréotaxique, la tête inclinée vers le bas pour permettre un accès plus facile à la citerne magna, un espace rempli de liquide céphalo-rachidien ou de LCR.

Une incision médiane du cuir chevelu expose la citerne magna, qui apparaît comme un triangle inversé entre le cervelet et la moelle, recouvert par la membrane durale.

Utilisez un coton-tige pour nettoyer l’excès de liquide de la dure-mère.

À l’aide d’une pince à épiler, saisissez une canule près de la partie de l’aiguille.

Insérez l’aiguille à un angle à travers la dure-mère au centre de la citerne magna, en évitant la pénétration dans le cervelet et la moelle.

Nettoyez tout LCR qui fuit.

Appliquez de l’adhésif sur la dure-mère pour fixer la canule, puis ajoutez un accélérateur de colle pour une adhérence immédiate.

Couvrez l’incision avec un mélange de ciment et d’adhésif, suivi d’un accélérateur de colle.

La souris canulée intracisternale est prête pour l’administration ciblée d’agents thérapeutiques dans le LCR.

Fixez la souris dans le cadre stéréotaxique, en utilisant soit l’arc intraneural, soit l’arc zygomatique. Ensuite, inclinez légèrement la tête de manière à ce qu’elle forme un angle de 120 degrés par rapport au corps.

Ensuite, appliquez une pommade ophtalmique et réappliquez-la au besoin pendant la chirurgie. Trouvez la crête occipitale, qui est la partie du crâne qui dépasse immédiatement au-dessus des muscles du cou. Soulevez la peau sus-jacente à l’aide d’une pince à épiler et coupez un morceau de peau en forme d’amande d’environ un centimètre le long de la ligne médiane.

Ensuite, en utilisant la crête occipitale comme point de référence, séparez le tissu conjonctif superficiel pour exposer les muscles du cou en dessous. Utilisez des cotons-tiges ou des lances oculaires pour contrôler tout saignement qui en résulte. Pour continuer, séparez les muscles de la ligne médiane en passant soigneusement la pince à épiler au milieu du site d’incision dans l’axe antérieur à postérieur.

Ensuite, avec une paire de pinces incurvées dans chaque main, joignez les pointes au milieu près du bas du crâne et écartez les muscles pour exposer la citerne magna. La citerne magna ressemble à un minuscule triangle inversé, délimité par le cervelet au-dessus et la moelle en dessous. À l’aide d’une lance chirurgicale ou d’un coton-tige, essuyez la membrane durale recouvrant le CM.Ensuite, avec une pince à épiler incurvée dans la main dominante, saisissez la canule près de l’aiguille recouverte d’un tube.

Ensuite, placez le majeur de l’autre main sur la barre d’oreille pour créer un repos stable pour la canule. Maintenant, au centre du CM, percez la dure-mère à 45 degrés par rapport à la tête de la souris. N’insérez l’aiguille qu’à l’endroit où se trouve le biseau sous la dure-mère pour éviter de pénétrer dans le cervelet ou la moelle.

Si nécessaire, nettoyez toute fuite de LCR à l’aide d’une lance ou d’un coton-tige. Ensuite, appliquez quelques gouttes de cyanoacrylate sur la membrane durale entourant la canule et ajoutez une goutte d’accélérateur de colle pour durcir la colle immédiatement. Ensuite, combinez du ciment dentaire et de la colle cyanoacrylate.

Ensuite, couvrez tout le site d’incision et appliquez rapidement une goutte d’accélérateur de colle pour durcir.