Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:12 min • August 29th, 2025
Prenez une culture de Staphylococcus aureus, une bactérie avec une paroi cellulaire épaisse de peptidoglycane.
Diluez la culture dans un milieu frais contenant des antibiotiques et incubez-la à une température chaude en l’agitant pour favoriser la croissance bactérienne.
Transférez la culture dans un tube et centrifugez-la pour granuler les bactéries.
Jetez le surnageant et placez la pastille sur de la glace pour protéger les bactéries des dommages.
Remettre la pastille en suspension dans un tampon de lyse et la transférer dans un tube contenant des billes de silice.
Insérez le tube dans un instrument de lyse cellulaire mécanique et lancez l’agitation.
Les collisions rapides entre les bactéries et les billes génèrent des forces de cisaillement. Cela lyse les bactéries, libérant de l’ADN, de l’ARN et des complexes ARN-protéines.
Les ions dans le tampon de lyse stabilisent les structures de l’ARN, tandis que les agents réducteurs dans le tampon inactivent les enzymes dégradant l’ARN.
Maintenant, centrifugez à nouveau le mélange pour granuler les débris.
Prélever le surnageant contenant des acides nucléiques et des protéines pour une analyse plus approfondie.
Cultiver une colonie de souches por
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