Méthode de microdilution en bouillon pour l’antibiogramme de bactéries à Gram positif
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 5:35 min • August 29th, 2025
Isolez les colonies bactériennes à Gram positif d’une plaque de culture et suspendez-les dans un milieu.
Diluer la suspension pour obtenir la concentration bactérienne optimale pour le dosage.
Inoculer les puits d’essai d’une microplaque contenant des concentrations croissantes d’un antibiotique lipoglycopeptide et d’un puits de contrôle de croissance contenant uniquement le milieu.
Étalez une aliquote du puits témoin sur des plaques de culture pour vérifier la pureté de la culture et le nombre de bactéries.
Incuber pour permettre la croissance bactérienne, au cours de laquelle la paroi cellulaire est synthétisée.
L’antibiotique se lie au peptidoglycane, un composant de la paroi cellulaire, et à ses précurseurs, inhibant la polymérisation et affaiblissant la paroi.
La perturbation permet à la pression osmotique de provoquer la lyse cellulaire.
Après l’incubation, confirmez la pureté de la culture et le nombre optimal de bactéries.
Inspectez les puits pour détecter la croissance bactérienne.
Le puits témoin montre une croissance visible, tandis que le puits d’essai avec la concentration d’antibiotiques la plus faible qui inhibe complètement la croissance indique la concentration minimale inh
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