Visualisation médiée par des nanoparticules du remodelage endo-lysosomal dans des cellules infectées par des bactéries

Prenez une lame chambrée contenant des cellules épithéliales humaines avec des endosomes marqués par fluorescence.

Introduire des bactéries pathogènes intracellulaires et incuber, leur permettant d’adhérer aux cellules.

Les bactéries injectent des protéines qui réorganisent le cytosquelette de l’hôte, formant des protubérances membranaires qui internalisent les bactéries dans des vacuoles.

Ces vacuoles prolongent des projections tubulaires reliées au système endo-lysosomal, un réseau de vésicules et d’organites régulant le trafic intracellulaire.

Ces projections redirigent le transport des vésicules et remodèlent le système endo-lysosomal.

Laver pour éliminer les bactéries extracellulaires, puis incuber avec un milieu contenant des antibiotiques pour éliminer toutes les bactéries restantes.

Remplacez-le par un support d’imagerie sans sérum contenant l’antibiotique et ajoutez des nanoparticules marquées avec un fluorophore contrastant.

Incuber pour permettre l’entrée des nanoparticules par endocytose et l’accumulation dans les vésicules remodelées.

Laver pour éliminer les nanoparticules non internalisées, puis incuber dans un milieu d’imagerie complété par du sérum.

Les nanoparticules fluore