Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:06 min • September 26th, 2025
Commencer avec une plaque de gélose contenant des colonies de Mycobacterium tuberculosis cultivées sur un milieu enrichi en nutriments.
Inoculez une seule colonie dans un bouillon enrichi en nutriments et incubez avec agitation pour une croissance uniforme.
Permettez à la culture d’atteindre la phase logarithmique tardive, où les cellules sont métaboliquement actives.
Pipetez un petit volume sur une plaque de gélose enrichie, étalez-le uniformément et incubez jusqu’à ce qu’une couche bactérienne continue se forme.
Humidifiez un écouvillon stérile avec un milieu minimal à faible teneur en fer (LIMM) et recueillez les bactéries.
Suspendez-les dans un récipient en plastique contenant des LIMM pour éviter la contamination par le fer.
Ajouter un agent dispersant pour éviter l’agglutination et incuber sans secouer.
Dans des conditions limitant le fer, les bactéries activent les réponses au stress et produisent des sidérophores dans le cytoplasme.
Ceux-ci sont emballés dans des vésicules extracellulaires et libérés dans l’environnement.
Les sidérophores capturent le fer et aident les bactéries à survivre.
Ce système met en évidence l’adaptation et la survie des mycobactéries dans des conditions lim
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