Transinfection bactérienne in vitro des lymphocytes T par formation de synapses immunologiques
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:05 min • September 26th, 2025
Commencer par des puits contenant des lymphocytes T CD4+ exprimant des récepteurs spécifiques au peptide de l’ovoalbumine ou OVAp.
Dans le puits de contrôle négatif, placez un insert de membrane poreuse.
Dans un tube, prélever des cellules dendritiques infectées par des bactéries et chargées d’OVAp pour une présentation en surface.
Ajoutez les cellules dendritiques directement dans le puits de test et dans l’insert du puits de contrôle négatif.
Ajoutez du milieu dans les puits et incuber.
Dans le puits de test, les cellules interagissent pour former une synapse immunologique, facilitant le transfert bactérien de la cellule dendritique à la cellule T, un processus connu sous le nom de transinfection.
Dans le puits de contrôle négatif, la barrière membranaire empêche l’interaction cellule-cellule, inhibant ainsi la transinfection.
Ajoutez l’antibiotique gentamicine dans les puits et incuber.
La gentamicine ne peut pas pénétrer les cellules eucaryotes, tuant ainsi uniquement les bactéries non internalisées tandis que les bactéries internalisées survivent.
L’échantillon de test contenant des lymphocytes T infectés et l’échantillon de contrôle contenant des lymphocytes T non infectés sont mainte
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