Une méthode visuelle sensible pour la détection des bactéries productrices de sulfure d’hydrogène

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Commencez avec une plaque contenant une suspension de diverses bactéries productrices de sulfure d’hydrogène capables de métaboliser des composés riches en soufre.

Ajoutez une solution de chlorure de bismuth contenant de la L-cystéine comme source de soufre et incubez brièvement le mélange.

Pendant l’incubation, les bactéries utilisent la L-cystéine et produisent du sulfure d’hydrogène, qui réagit avec les ions bismuth pour former un précipité de sulfure de bismuth noir insoluble.

Cette réaction change la couleur de la solution du jaune clair au noir, indiquant la production de sulfure d’hydrogène.

Ensuite, effectuez le test en utilisant des concentrations variables d’hydrosulfure de sodium comme étalon de sulfure d’hydrogène et ajoutez du chlorure de bismuth.

Cela génère un dégradé de couleurs allant du noir clair au noir intense, représentant les niveaux de sulfure d’hydrogène.

Maintenant, utilisez ce gradient pour comparer visuellement et estimer les niveaux de sulfure d’hydrogène dans les échantillons bactériens, ce qui permet de détecter rapidement les bactéries productrices de sulfure d’hydrogène.

Mélangez 100 microlitres de culture bactérienne avec 100 microlitres de solution de bismuth nouvellement préparée dans les plaques de microtitration à 96 puits, et cultivez pendant 20 minutes à 37 degrés Celsius. Pour chaque souche bactérienne, effectuez l’analyse en trois exemplaires.

Après 20 minutes, vérifiez le changement de couleur. Si la couleur de la solution passe du jaune clair au noir, cela indique que la bactérie est capable de produire du sulfure d’hydrogène ou du H2S. Répétez cette mesure trois fois.

Déterminer la sensibilité de la méthode à l’aide de différentes concentrations d’hydrosulfure de sodium mélangé à une solution de sulfure de bismuth. Enfin, déterminez la présence de bisulfure et d’ions sulfure en observant la formation d’un précipité de sulfure de bismuth noir. Marquez la couleur des puits à l’aide d’une échelle visuelle allant de l’absence de production de couleur à la production de couleur noire la plus foncée.

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Last updated: 18 July 2026