Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:45 min • September 26th, 2025
Prenez des puces microfluidiques avec des chambres de croissance et de médicament séparées par une valve micromécanique.
Chargez des souches mutantes d’E. coli de type sauvage et résistantes au TMP, en suspension dans un milieu, dans les chambres de croissance à l’aide d’une pression, où le triméthoprime (TMP) est l’antibiotique testé.
Ensuite, chargez les chambres médicamenteuses avec des milieux contenant une faible concentration de TMP pour induire un stress cellulaire chez les bactéries.
Actionnez la valve micromécanique pour permettre la diffusion du TMP dans les chambres de croissance, permettant ainsi l’entrée du TMP dans les bactéries.
Placez les puces dans l’incubateur monté sur la platine du microscope inversé et lancez l’imagerie en accéléré.
Chez E. coli de type sauvage, le TMP se lie à l’enzyme dihydrofolate réductase, empêchant la liaison du dihydrofolate et provoquant une filamentation induite par le stress et une multiplication bactérienne réduite.
Cependant, la structure DHFR altérée de la souche mutante empêche la liaison du TMP, permettant une multiplication normale.
Observez les images en accéléré.
La souche E . coli de type sauvage présente une filamentation et une mul
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