Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:49 min • September 26th, 2025
Placez une lame de microréseau stérilisée, recouverte d’agarose, avec plusieurs points de polymère dans une plaque multipuits. L’agarose minimise la liaison bactérienne non spécifique.
Ajoutez une culture bactérienne mixte à la lame et incubez-la en agitant doucement.
Les bactéries sécrètent des protéines d’adhésion distinctes qui se lient à des points favorables aux polymères, ce qui entraîne une fixation et une colonisation bactériennes plus fortes au fil du temps.
À l’inverse, les polymères répulsifs résistent à l’adsorption des protéines et réduisent la fixation bactérienne.
Rincez la lame avec une solution saline tamponnée au phosphate ou PBS pour éliminer les bactéries faiblement liées.
Ajoutez du DAPI pour colorer l’ADN des bactéries attachées à la surface.
Lavez la diapositive avec du PBS, séchez-la et scellez-la avec une lamelle adhésive.
Stérilisez la surface extérieure de la lame avec de l’éthanol.
Capturez des images en fond clair pour localiser les taches de polymère. Ensuite, passez en mode fluorescence pour détecter la fluorescence sur les taches de polymère.
Les taches de polymère qui présentent une fluorescence réduite indiquent une fixation bactérienne minimale et sont ide
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