Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:16 min • September 26th, 2025
Commencez par un échantillon d’eau contenant des bactéries d’origine hydrique et filtrez-le pour éliminer les débris.
Transférez le filtrat dilué sur des plaques de gélose à faible teneur en nutriments, chacune complétée par un antibiotique spécifique. Étalez le filtrat et incuberez.
Les bactéries porteuses d’un gène spécifique de résistance aux antibiotiques se développent sur les plaques d’antibiotiques correspondantes et forment des colonies.
Comptez les colonies pour déterminer les unités formant colonies (UFC), représentant le nombre de bactéries résistantes aux antibiotiques.
Sélectionnez une seule colonie dans chaque assiette et suspendez-la dans de l’eau distillée stérile.
Chauffez la suspension pour lyser les cellules et libérer le contenu intracellulaire, y compris l’ADN bactérien qui contient le gène de résistance aux antibiotiques.
Centrifugez les tubes pour séparer les débris et recueillir le surnageant contenant de l’ADN.
Ajoutez des réactifs d’amplification à l’ADN extrait.
Placez les tubes dans un thermocycleur et exécutez le programme pour amplifier une région spécifique de l’ADN bactérien.
L’ADN amplifié est prêt pour l’analyse de séquence afin d’identifier le gène de rési
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