Détection d’un analyte cible à l’aide d’un biocapteur bactérien

Commencez avec un tube contenant une culture bactérienne génétiquement modifiée pour agir comme un biocapteur.

Les bactéries hébergent un système plasmidique avec une protéine fluorescente rouge ou gène RFP sous le contrôle d’un promoteur. Le promoteur est réprimé par une protéine sensible à la présence d’un analyte spécifique, comme le plomb.

Utilisez une lingette à base d’éthanol pour essuyer soigneusement une surface d’essai et recueillir l’analyte présent sur la surface.

Coupez une petite section au centre de la lingette et immergez-la complètement dans la culture bactérienne.

Incuber pour faciliter la diffusion de l’analyte de la lingette dans la culture bactérienne.

L’analyte pénètre dans la bactérie et se lie à la protéine répressive, modifiant sa conformation et activant le promoteur.

Le promoteur activé initie la transcription du gène, conduisant à l’expression de la RFP.

Mesurer la fluorescence bactérienne pour s’assurer de la présence de l’analyte sur la surface de l’essai.

Utilisez une lingette à base d’éthanol conçue pour enlever le plomb pour essuyer toutes les surfaces des mains, y compris entre les doigts. Conservez les lingettes dans un sac refermable étiqueté de manière appropriée jusqu’à l’analyse. Utilisez une lingette à base d’alcool pour essuyer les grandes surfaces à tester.

Utilisez un tampon de coton imbibé d’éthanol pour essuyer les petites surfaces à tester. En portant des gants propres et en utilisant des ciseaux nettoyés à l’alcool, coupez une section d’environ un centimètre carré au centre de la lingette. Ensuite, placez le morceau de lingette coupé, ou coton-tige, directement dans un tube de culture contenant deux millilitres de bactéries capteurs, et assurez-vous qu’il est complètement immergé dans le bouillon.