Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:05 min • September 26th, 2025
Commencez par un tube stérile contenant un milieu de croissance spécifique à l’hôte. Ajouter une culture bactérienne hôte cultivée pendant la nuit.
Ensuite, introduisez un filtrat contenant des Saccharibacteria, une bactérie parasite ultrapetite, pour établir une culture binaire.
Incuber la culture binaire dans des conditions microaérobies optimales pour les bactéries hôtes.
Les nutriments contenus dans le milieu favorisent la croissance et la prolifération des bactéries hôtes, ce qui rend la culture trouble.
En raison de leur nature parasite obligatoire, les saccharibactéries se fixent à la surface des cellules bactériennes de l’hôte.
Ces bactéries forment alors des contacts membranaires étroits avec l’hôte et extraient les nutriments essentiels à leur survie et à leur prolifération.
Au fur et à mesure que l’infection progresse, la croissance de l’hôte bactérien ralentit, ce qui entraîne une réduction de la turbidité.
Pour soutenir une croissance continue, transférez la culture binaire dans un nouveau milieu à intervalles réguliers.
Cela maintient la viabilité de l’hôte et favorise la stabilité à long terme de la culture binaire.
Préparez les tubes de culture en aliquotent deux millilitres de milieu de croissance approprié dans les tubes.
Ensuite, ajoutez 200 microlitres de culture nocturne d’organismes hôtes et 100 à 200 microlitres d’échantillon filtré remis en suspension dans chaque tube. Incuber les échantillons combinés dans des conditions appropriées pour l’organisme hôte. Passez les cellules tous les deux à trois jours en transférant 200 microlitres de la culture binaire dans deux millilitres de milieu de croissance frais dans un nouveau tube.
Si les cultures passées ne montrent aucune croissance à 200 microlitres de culture hôte non infectée, lors du passage des cellules, retournez les tubes inoculés dans l’incubateur.