Sous-culture de bactéries anaérobies sulfito-réductrices à partir d’une culture de gélose

0 views • 2:15 min • September 26th, 2025

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Commencer avec une plaque de gélose différentielle pré-inoculée avec un échantillon d’aliment et contenant des colonies bactériennes cultivées.

Les bactéries aérobies se développent à la surface, tandis que les bactéries anaérobies se développent plus profondément dans la gélose, où les bactéries réductrices de sulfite réduisent le sulfite en sulfure d’hydrogène.

Le sulfure d’hydrogène réagit ensuite avec le citrate d’ammonium ferrique dans le milieu, formant un précipité noir.

Observez la plaque de gélose pour détecter la présence de taches noires dans les couches plus profondes, indiquant des bactéries réductrices de sulfites.

Pour sous-cultiver ces bactéries, utilisez un grattoir cellulaire stérile pour éliminer doucement la couche indésirable de bactéries aérobies, créant ainsi un point d’entrée propre.

Insérez un compte-gouttes stérile dans le milieu sans introduire d’air pour préserver les conditions anaérobies.

Extrayez soigneusement la colonie noire incrustée.

Transférez la colonie dans un tube stérile contenant du milieu de croissance frais.

Enfin, fermez hermétiquement le tube et incubez-le dans des conditions anaérobies pour favoriser la croissance des bactéries réductrices de sulfites.

Après l’incubation, examinez les plaques pour détecter la croissance bactérienne.

Les bactéries aérobies peuvent être présentes à la surface de la gélose, tandis que les bactéries anaérobies seront intégrées dans la gélose. Les bactéries sulfites réductrices rendront la gélose environnante noire, et les colonies possibles de C perfringens seront noires et intégrées dans la gélose. S’il y a une quantité dense de croissance bactérienne aérobie à la surface de la plaque, utilisez un grattoir cellulaire pour retirer les colonies des zones sélectionnées.

À l’aide d’un compte-gouttes stérile à usage unique, on peut prélever les colonies suspectées de C perfringens de la gélose, en veillant à expulser l’air avant de percer la gélose. Transférez les colonies à 10 millilitres de RPM frais dans un tube conique de 15 millilitres. Plusieurs colonies pourraient être échantillonnées à partir de la même plaque dans des cultures RPM distinctes.

Fixez fermement les couvercles des tubes coniques, enveloppez-les dans un film de paraffine et incuberez-les pendant la nuit à 37 degrés Celsius.

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Détecter Cortex Fragments Pendant bactérienne Spore Germination

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Last updated: 18 July 2026