Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:35 min • September 26th, 2025
Commencez par une lame de verre chambrée recouverte d’une membrane supportée composée de phospholipides, y compris des phospholipides biotinylés.
Incuber avec de la neutravidine, qui se lie à la biotine sur la bicouche. Lavez pour enlever l’excès de neutravidine.
Introduisez un milieu nutritif contenant des vésicules géantes ou GV. Chaque GV est une vésicule bicouche lipidique sphérique de la taille d’un micron qui encapsule une seule cellule bactérienne, servant de modèle pour étudier le comportement cellulaire individuel dans un environnement confiné.
La neutravidine se lie aux lipides biotinylés du GV, fixant les vésicules à la membrane supportée pour une observation stable à long terme dans des conditions statiques.
Scellez la chambre pour maintenir l’hydratation et minimiser la contamination.
Placez la lame sur une platine de microscope équipée d’une plate-forme chauffante pour simuler les conditions physiologiques et observez au microscope.
Les nutriments du milieu se diffusent dans le GV pour favoriser la croissance bactérienne au fil du temps.
Cette configuration permet de visualiser en temps réel la croissance bactérienne unicellulaire dans des microenvironnements de vésicules co
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