Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 4:20 min • September 26th, 2025
Commencez avec une plaque multi-puits contenant un milieu de croissance pré-inoculé avec des bactéries productrices de cellulose.
Dans le puits traité, le milieu est complété par de l’acide 2-chloroéthylphosphonique (CEPA).
Scellez la plaque pour éviter les échanges gazeux et l’incincubation.
Pendant l’incubation, CEPA hydrolyse et libère de l’éthylène, une molécule gazeuse.
L’éthylène active la cellulose synthase bactérienne, qui utilise l’UDP-glucose cytosolique pour synthétiser la cellulose.
Au fil du temps, les bactéries extrudent de la cellulose à travers leur membrane.
Cela favorise l’auto-assemblage bactérien à l’interface air-liquide, formant un biofilm flottant à base de cellulose, ou pellicule.
Après l’incubation, transférez les pellicules dans une nouvelle assiette multi-puits. Ajoutez une solution alcaline et incubez à une température plus élevée pour lyser les cellules.
Retirez la solution alcaline. Laver à plusieurs reprises en agitant pour éliminer les débris cellulaires tout en conservant la cellulose.
Séchez et pesez les pellicules. Un poids sec plus élevé dans les échantillons traités par CEPA par rapport au témoin indique une production accrue de cellulose bactérienne en
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