Inactivation de bactéries à l’aide d’un mononucléotide de flavine activé par la lumière

Commencez par inoculer une bactérie pathogène dans un tube contenant un milieu liquide.

Incuber pour favoriser la prolifération bactérienne, puis transférer la culture dans des tubes frais.

Faites tourner les cellules en pastilles et jetez le surnageant.

Remettre les granules bactériennes en suspension dans des solutions tampons contenant des concentrations croissantes de flavine mononucléotide (FMN), un photosensibilisant et une solution tampon sans FMN pour servir de contrôle.

Mélangez soigneusement le contenu du tube et transférez les suspensions dans des tubes en verre.

Exposez les tubes à la lumière visible pour photoactiver la FMN, qui réagit avec l’oxygène moléculaire pour générer des espèces réactives de l’oxygène (ROS).

Les ROS endommagent les composants cellulaires bactériens, réduisant ainsi la viabilité bactérienne.

Transférez les aliquotes de l’échantillon sur un milieu solide, étalez-les uniformément et incubez pour permettre aux bactéries viables survivantes de se développer en colonies.

Après l’incubation, quantifier les colonies et calculer le pourcentage de réduction de la viabilité bactérienne par rapport au témoin afin d’évaluer l’effet dose-dépendant de la FMN.

Inoculez