Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Commencer avec une souche de la bactérie Pseudomonas aeruginosa , isolée d’un sol contaminé par l’huile, dans un milieu contenant une source d’azote et un excès d’huile comestible comme source de carbone.
Cette souche synthétise le polyhydroxyalcanoate (PHA), un polymère à longue chaîne utile dans la production de bioplastiques.
Incuber sous agitation pour faciliter l’aération et favoriser la croissance bactérienne.
Initialement, le milieu fournit à la fois des sources de carbone et d’azote pour soutenir la prolifération bactérienne et générer une biomasse élevée.
Après une croissance substantielle, l’appauvrissement en azote dans le milieu arrête la division cellulaire et redirige la source de carbone excédentaire vers la biosynthèse des PHA.
Les bactéries sécrètent des lipases qui décomposent l’huile en acides gras, qui sont métabolisés par des enzymes intracellulaires en précurseurs de PHA.
L’enzyme PHA synthase polymérise ces précurseurs en PHA.
Les PHA s’accumulent à l’intérieur des granules cytoplasmiques, connus sous le nom de corps d’inclusion, ce qui entraîne une augmentation de la taille des cellules.
La biomasse bactérienne enrichie en PHA est maintenant prête pour les analyses
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