Microcalorimétrie isotherme pour surveiller l’activité métabolique des bactéries
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 1:27 min • October 30th, 2025
Prenez des dilutions en série d’une culture bactérienne et ajoutez des aliquotes dans des flacons calorimétriques contenant du milieu de croissance.
Chargez les flacons scellés dans la plaque multi-puits d’un microcalorimètre isotherme pour mesurer la production de chaleur métabolique.
L’appareil est maintenu à une température constante pour s’assurer que la chaleur détectée provient uniquement du métabolisme bactérien.
Lorsque les bactéries métabolisent les nutriments et prolifèrent, elles libèrent de la chaleur que les capteurs détectent en temps réel.
En parallèle, incuber des flacons identiques dans un incubateur. À l’aide d’un spectrophotomètre, mesurez la densité optique (DO) pour surveiller la croissance bactérienne.
À l’aide des signaux calorimétriques des dilutions, construisez une courbe d’activité thermique et corrélez-la avec les valeurs de DO.
Un premier pic brutal indique une respiration aérobie au cours d’une croissance exponentielle.
Lorsque l’oxygène devient limitant, les cellules passent à la fermentation anaérobie, produisant un deuxième pic aigu.
Lorsqu’elles entrent dans la phase stationnaire, les bactéries sécrètent des enzymes pour dégrader les protéines extracellula
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