Mesure de la liaison d’un médicament au caséum à partir de lésions tuberculeuses par la méthode de dialyse à équilibre rapide

Prenez une suspension homogène de caséum - la matière nécrotique et riche en lipides des lésions de tuberculose, qui abrite des mycobactéries tolérantes aux médicaments en son cœur.

Ajouter le médicament d’essai à l’homogénat et au vortex pour faciliter son interaction avec la matrice du caséum.

Placez un insert de dialyse à équilibre rapide contenant les chambres donneuse et réceptrice séparées par une membrane semi-perméable dans la plaque de base.

Chargez l’homogénat enrichi du médicament dans la chambre donneuse et ajoutez un tampon dans la chambre réceptrice.

Scellez la plaque et incubez en rotation.

Pendant l’incubation, le médicament libre se diffuse à travers la membrane, atteignant l’équilibre entre les deux chambres.

Une fois l’équilibre atteint, diluer l’échantillon donneur avec un tampon et l’échantillon récepteur avec un homogénat sans médicament pour normaliser les conditions matricielles pour la quantification du médicament.

Enfin, quantifiez la concentration du médicament et calculez la fraction médicamenteuse non liée ou fu.

Le fu reflète le médicament libre disponible pour se diffuser dans le caséum et atteindre les mycobactéries tolérantes aux médicaments.

Ajouter 6,5 mic