Technique de préparation d’une culture bactérienne monoclonale

Commencez par une culture bactérienne et effectuez une dilution en série pour réduire la densité cellulaire.

Prenez une petite aliquote de la dilution finale et placez-la sur une plaque de gélose.

Ajoutez des billes de verre stériles et secouez doucement la plaque pour assurer la séparation spatiale des cellules, ce qui est essentiel pour obtenir des colonies bien isolées.

Retirez les perles de verre, puis retournez la plaque et incuberez.

Les cellules individuelles prolifèrent et forment des colonies distinctes, générant une culture monoclonale dans laquelle chaque colonie est constituée d’une population bactérienne génétiquement uniforme.

Prélevez des colonies individuelles et transférez-les dans des tubes séparés contenant un milieu liquide.

Incuber les tubes avec agitation. Après l’incubation, évaluer la turbidité de chaque culture.

Les cellules bactériennes en suspension dans le milieu diffusent la lumière, ce qui rend les cultures plus troubles avec l’augmentation de la densité cellulaire.

Sélectionnez le tube avec la turbidité la plus élevée, ce qui indique la population bactérienne monoclonale la plus dense, pour les applications en aval.

Étiquetez les trois bouteilles préparées ave