Production et dépôt par aérosol de spores de Bacillus subtilis
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:37 min • October 30th, 2025
Commencez par une culture de Bacillus subtilis, une bactérie sporulée très résistante.
Inoculer la culture dans un milieu pauvre en nutriments et incuber avec aération pour induire la sporulation.
Les cellules sporulantes produisent des spores dormantes avec des couches protectrices.
Transférez la culture dans un tube et centrifugez-la pour granuler les spores. Retirez le surnageant contenant les cellules résiduelles et les débris.
Lavez la pastille avec de l’eau distillée stérile, répétez la centrifugation et remettez les spores en suspension dans de l’eau stérile.
À l’aide d’un microscope à contraste de phase, confirmez la pureté des spores en identifiant les spores brillantes et en vérifiant l’absence de contaminants.
Effectuez des dilutions en série des spores, plaquez sur de la gélose nutritive et incubez pour permettre la germination des spores viables en colonies. Comptez les colonies pour déterminer la concentration des spores.
En fonction de cette concentration, ajustez la quantité de spores et chargez l’échantillon dilué dans une buse aérosol. Vaporisez-le sur une surface en verre stérile où la suspension sèche rapidement pour former une monocouche mince et uniforme de spores.
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