JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologie
0 vues • 2:14 min • October 30th, 2025
Commencez par un extrait de levure Todd-Hewitt stérile, ou plaque de gélose THY, un milieu riche en nutriments qui favorise la croissance de Streptococcus mitis, une bactérie pathogène.
À l’aide d’une boucle stérile, striez la plaque avec la souche bactérienne.
Placez la plaque inoculée dans un pot à bougie, allumez une bougie, fermez le pot hermétiquement et incuberez.
La bougie allumée consomme de l’oxygène et augmente les niveaux de dioxyde de carbone, créant un environnement microaérophile qui imite les conditions de l’hôte.
Les nutriments contenus dans le milieu et l’environnement microaérophile du pot favorisent la prolifération bactérienne et favorisent le développement d’un phénotype de virulence.
Après l’incubation, retirez le couvercle du bocal et récupérez la plaque.
À l’aide d’une boucle stérile, prélevez une seule colonie isolée et transférez-la dans un tube conique stérile contenant du bouillon TH.
Incuber la culture dans des conditions statiques pour favoriser la croissance bactérienne tout en préservant le phénotype de virulence.
Cette culture peut être utilisée comme modèle pathogène pour étudier les interactions hôte-pathogène.
Avant la préparation des streptocoques du groupe Mitis, réchauffez les plaques de gélose THY dans un incubateur à 37 degrés Celsius.
Après cela, utilisez une boucle stérile pour faire ressortir les souches souhaitées de Streptococci sur les plaques.
Ensuite, mettez les assiettes dans un pot à bougie et incubez le pot à 37 degrés Celsius pendant une nuit pendant environ 18 heures pour créer un environnement microaérophile.
Le lendemain, retirez les assiettes du pot à bougie et utilisez une boucle stérile pour prélever des colonies isolées.
Inoculer des tubes coniques stériles de 15 millilitres contenant 2 millilitres de bouillon THY.
Fermez bien les bouchons et incubez les tubes à 37 degrés Celsius dans des conditions statiques.