Synchronisation des cultures cyanobactériennes et compactage de l’ADN pilotés par des cycles lumière-obscurité

Commencez par une plaque de gélose riche en nutriments complétée par du thiosulfate.

Striez les cyanobactéries et incubez sous des périodes alternées de lumière et d’obscurité pour maintenir le cycle circadien.

Pendant la période de lumière, l’absorption des nutriments et le thiosulfate favorisent la croissance bactérienne et la condensation de l’ADN.

Pendant la période sombre, les cellules conservent leur énergie et se divisent.

Le cycle alterné lumière-obscurité synchronise les cellules au même stade de croissance et de division.

Après la période de lumière, ajoutez une solution de saccharose et pipetez à plusieurs reprises pour libérer les cyanobactéries, provoquant un changement de couleur. Transférez les cellules dans un tube.

Ajoutez un colorant fluorescent spécifique à l’ADN et incubez dans l’obscurité. Le colorant se lie à l’ADN cyanobactérien.

Centrifugeuse pour séparer les cyanobactéries et éliminer le surnageant.

Remettez les cyanobactéries en suspension dans une solution de saccharose, transférez la suspension sur une lame et couvrez-la.

Au microscope à fluorescence, l’ADN condensé bleu dans les cellules confirme la progression synchronisée et circadienne du cycle cellulaire cya