Synthèse d’antigènes protéiques membranaires stabilisés à l’aide d’un système acellulaire

Prenons l’exemple d’un système bactérien exempt de cellules qui n’a pas de structures cellulaires intactes, mais qui conserve les composants moléculaires nécessaires à la transcription et à la traduction in vitro .

Introduire des plasmides codant pour l’antigène de la protéine membranaire et la protéine d’échafaudage, ainsi que des phospholipides et des polymères synthétiques.

Complétez le mélange avec de l’ATP, du GTP et un mélange d’acides aminés pour initier la synthèse des protéines.

Simultanément, préparez une solution alimentaire enrichie avec le mélange d’acides aminés.

Chargez le mélange dans la chambre intérieure et la solution d’alimentation dans la chambre extérieure d’un appareil de dialyse à deux compartiments.

Pendant l’incubation, les substrats diffusent de la chambre externe vers la chambre intérieure à travers la membrane semi-perméable, facilitant la transcription des plasmides et la traduction des protéines.

La protéine d’échafaudage assemble les phospholipides et les polymères en nanodisques lipidiques et facilite le repliement et l’incorporation de l’APM dans ces structures.

Les sous-produits générés au cours de la réaction se diffusent dans la chambre externe, mainte