Perturbation mécanique de vers individuels pour évaluer la variabilité des interactions hôte-bactérie
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 5:09 min • October 30th, 2025
Commencez avec des vers adultes C . elegans du même âge, stériles et fraîchement tués avec des cuticules perméabilisées, en suspension dans un tampon.
Ces vers sont infectés par des bactéries dans leur tractus intestinal.
Prenez une plaque de puits profond contenant des particules abrasives dans un tampon et transférez un seul ver dans chaque puits.
Couvrez la plaque d’un film d’étanchéité et d’un couvercle.
Incuber la plaque à basse température pour éviter la surchauffe lors de la perturbation des tissus.
Appuyez sur le couvercle pour sceller les puits.
À l’aide d’un perturbateur tissulaire, secouez mécaniquement la plaque. Les particules abrasives perturbent les tissus des vers, libérant des bactéries intestinales.
Tapotez la plaque et centrifugez-la pour granuler le contenu.
Mélangez le contenu pour répartir uniformément les bactéries, puis transférez-les dans des puits frais.
Diluer en série la suspension bactérienne dans un tampon.
Déposer les dilutions sur des plaques de gélose et incuber pour permettre la formation de la colonie.
Comptez les colonies pour quantifier la variation des charges bactériennes intestinales entre les vers individuels.
Pour se préparer à la rupture mécanique des
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