Préparation d’une culture de boues anaérobies dans des conditions sans oxygène

Commencez par une fiole contenant de l’eau distillée.

Faites bouillir l’eau pour éliminer l’oxygène dissous, minimisant ainsi l’oxygène résiduel qui peut inhiber la croissance anaérobie.

Refroidissez l’eau tout en rinçant continuellement à l’azote pour éviter la réabsorption d’oxygène.

Placez le ballon sur une balance et ajoutez une quantité fixe de boues de digesteur anaérobie.

Les boues contiennent différents types de microbes anaérobies et de matières organiques résiduelles.

Ajoutez de l’azote et fermez immédiatement le ballon avec un septum en caoutchouc pour maintenir des conditions anaérobies.

Incuber en secouant pour disperser uniformément les bactéries anaérobies et stimuler le métabolisme en améliorant le contact avec la matière organique dans les boues.

L’environnement sans oxygène permet aux anaérobies obligatoires de proliférer en prévenant les dommages métaboliques induits par le stress oxydatif.

Après l’incubation, laissez les plus grosses particules de boue se déposer.

Ensuite, à l’aide d’une seringue, prélevez l’inoculum anaérobie.

Transférez l’inoculum dans une fiole de sérum contenant un milieu de croissance sans oxygène pour favoriser la survie des bactéries anaérobies.

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