Name: Course de modélisation chez la souris - Moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-06T17:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 28 s
Description: Apprenez la technique d'occlusion de l'artère cérébrale moyenne par filament chez la souris pour modéliser l'ischémie cérébrale focale. Cette méthode reproduit fidèlement les lésions vasculaires et permet d'évaluer les déficits neurologiques post-AVC.

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Ce travail a été financé par le Programme de la Communauté européenne septième programme-cadre (FP7/2007-2013) sous convention de subvention n ° 201024 et n ° 202213 (Réseau European Stroke). Un financement supplémentaire a été donnée par le Bundesministerium für Bildung und Forschung (Centre for Stroke Research à Berlin), et la Deutsche Forschungsgemeinschaft (Exzellenzcluster NEUROCURE). Les auteurs tiennent à remercier Mareike Thielke (Dép. des Experimental Neurology, Charité de Berlin) pour le soutien lors de l&#39;opération et Elke Ludwig (services vidéo de la Charité) pour la production de l&#39;animation.

Pour garantir une haute qualité et de reproductibilité, nous recommandons l'utilisation de procédures opérationnelles normalisées (SOP). Dans cette vidéo, IPO a publié aussi développée et utilisée dans notre laboratoire sont appliquées 1. 1. Occlusion Artère cérébrale moyenne <ol><li> Les souris sont anesthésiées avec un régime approprié anesthésique consulter le personnel vétérinaire. (Par exemple, induction avec 1,5 - 2% isoflurane et de l'entretien avec 1,0 - 1,5% isoflurane dans 2 / 3 de N2O et 1 / 3 O2 aide d'un vaporisateur). <ol><li> La température corporelle des souris est maintenu à 36,5 ° C ± 0,5 ° C pendant une intervention chirurgicale avec une plaque chauffante. Un coussin chauffant rétroaction contrôlée, ce qui réchauffe en fonction de la température rectale de la souris, est fortement recommandée. </li><li> Désinfecter la peau et la fourrure entourant avec un agent approprié (par exemple l'alcool éthylique à 70%) et le sécher ensuite. </li></ol></li><li> Une incision est faite ligne médiane du cou et les tissus mous sont séparés. </li><li> L'artère carotide commune gauche (ACCV) est soigneusement disséquée par les nerfs environnants (sans nuire au nerf vagal) et une ligature est faite en utilisant 6.0/7.0 chaîne. Chaîne de 5.0 peut également être utilisé. </li><li> La gauche l'artère carotide externe (LECA) est ensuite séparé et un second nœud est fait. </li><li> Ensuite, l'artère carotide interne gauche (LICA) est isolé et un noeud est préparé avec un filament de 6,0. </li><li> Après l'obtention de bonne vue de l'artère carotide interne gauche (LICA) et l'artère ptérygo (APL), les deux artères sont coupées, à l'aide d'un clip microvasculaires. </li><li> Un petit trou est coupé dans la LCCA avant qu'il ne bifurque à l'LECA et la LICA. Un monofilament en nylon enduit avec 8,0 mélange durcisseur de silicium (voir ci-dessous) est alors introduit dans la LICA, jusqu'à ce qu'il s'arrête à la pince. Attention, doit être payé à ne pas saisir l'artère occipitale. (Figure 1) </li><li> Les artères coupées sont ouvertes tandis que le filament est inséré dans la LICA pour occlure l'origine de la LMCA dans le cercle de Willis. </li><li> Le troisième noeud sur la LICA est fermé pour fixer le filament en position. </li><li> Les souris reçoivent une solution saline 0,5 ml par voie sous cutanée que réapprovisionnement en volume. Pour soulager la douleur, lidocaïne gel est appliqué localement dans la plaie. </li><li> Si la reperfusion est destiné, souris séjour pour 30 à 90 min d'occlusion dans une cage chauffée, la blessure pourrait être fermé avec un clip de suture petits. Ensuite, une deuxième anesthésie est effectuée, le troisième noeud sur le ICA est momentanée ouvert et le filament retirée. </li><li> Les sutures restantes sont raccourcis et la peau est adaptée avec une suture chirurgicale. </li><li> Tous les animaux reçoivent une reconstitution second volume tel que décrit ci-dessus. </li><li> Les animaux sont mis dans une cage chauffée pendant deux heures pour contrôler la température du corps. <ol><li> Les animaux doivent être contrôlés quotidiennement après la chirurgie pour des signes d'inconfort. Les souris pourraient montrer une certaine perte de poids post-chirurgicales. Ils reçoivent de la nourriture en purée dans un boîte de Petri placées sur le plancher pour l'encourager à manger. La nourriture est remplacé par jour pendant sept jours. </li></ol></li></ol> 2. Sham Fonctionnement <ol><li> Pour les opérations de simulacre le filament est inséré à occlure LMCA et retiré immédiatement pour permettre la reperfusion instantanée (1,8). L'opération suivante est identique à celle pratiquée sur les animaux subissant une ischémie cérébrale (01.09 à 01.14), y compris une seconde anesthésie. </li></ol> 3. Préparation du filament <ol><li> Stérilité du filament doit être envisagée. L'utilisation de l'équipement stérilisé ainsi que d'un traitement approprié du filament est ensuite une condition préalable à une chirurgie stérile. Désinfection du filament est difficile, car la plupart des méthodes de stérilisation commune peut nuire à la qualité du filament. Cependant les méthodes telles que le rayonnement, par exemple avec une lumière UV ou les rayons γ, ou la stérilisation chimique, par exemple avec des gaz hautement réactifs tels que l'oxyde d'éthylène, sont applicables. </li><li> 8,0 filaments de nylon est coupé en longueurs de 11 mm sous le microscope </li><li> La pointe filament doit être revêtue complètement et uniformément sur une longueur de 8 mm avec un mélange durcisseur de Xantopren M muqueuse et Activator NF Optosil </li></ol> 4. Les résultats représentatifs Selon la durée de la restriction du flux sanguin, le moteur différentes et de comportement résulte des déficits. Les deux après 30 et 60 min d'ischémie cérébrale, les animaux dans la plupart des cas présentent une résistance réduite à poussée latérale et indirecte en raison de perturbations dans la locomotion. Milder manifestent des lésions comme une position fléchisseurs de l'avant liMBS. Ces signes facilement observables peut être utilisé comme un score de base pour le succès de l'opération 2. Morphologiquement la lésion peut être évaluée en utilisant soit l'histologie ou l'imagerie par résonance magnétique (IRM). Soixante minutes d'occlusion de l'artère cérébrale moyenne produit pannecrosis tissus dans une zone comprenant à la fois le striatum et le néocortex, alors que 30 minutes d'ischémie provoquer la mort cellulaire neuronale essentiellement limitée dans le striatum. 3 (figure 2) En termes de volume de l'infarctus, nous nous attendons une déviation standard inférieure à 30% en un ensemble d'opérations. La mortalité dépend du temps d'occlusion avec près de 5% après 30 min d'ischémie et 10 - 20% après 60 min. Une autre possibilité minimale invasive est l'utilisation de laser Doppler (LDF) pendant l'opération, ce qui permet un contrôle direct de son succès. Dans un animal en particulier, la réduction à 10 - 20% des valeurs preocclusion indique clairement l'induction réussie d'une ischémie cérébrale focale 4 Toutefois, LDF ne peut pas être utilisée comme une méthode pour les comparaisons interindividuelles, depuis FDL ne peut mesurer les changements quantitatifs (en pourcentage) de sang. écoulement dans un volume d'échantillon de tissu de petites et limitées. Il ne donne pas d'information sur l'étendue spatiale de la réduction du flux sanguin. 5 Il existe plusieurs tests pour évaluer les aspects comportementaux après un AVC, y compris la démarche d'analyse 6,7, Rotarod 8, Pôle de test 9,10, test de suppression adhésive 11,12, 13,14 test de l'escalier, le test barreau d'échelle et de 15,16 labyrinthe d'eau de Morris 17. Dans tous ces tests, les souris soumises à MCAo effectuent moins de succès que les animaux témoins. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig1.jpg" alt="Figure 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 1"> Figure 1. Schéma de l'architecture des navires irriguant le cerveau (représentée en arrière-plan) chez la souris. Différentes souches peuvent présenter des variations, par exemple l'artère occipitale laisse parfois de l'artère carotide interne. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig2.jpg" alt="Figure 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 2"> Figure 2. Illustration schématique de la taille des lésions typiques après différents temps de la reperfusion dans le modèle proximale MCAo. Au milieu, le parcours typique de l'activité fonctionnelle et le débit sanguin cérébral après MCAo sont représentés. (MCAo: artère cérébrale moyenne d'occlusion, LDF: mesure laser Doppler)

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<li>Engel, O., Meisel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+Infection+Before+and+After+Stroke%3A+Investigating+New+Targets%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Disord+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Models of Infection Before and After Stroke: Investigating New Targets.</a> Infect Disord Drug Targets. 9, (2010).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+bedside%3A+the+quest+for+quality+in+experimental+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 26, 1465-1478 (2006).</li>
<li>Macleod, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Good+laboratory+practice%3A+preventing+introduction+of+bias+at+the+bench%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Good laboratory practice: preventing introduction of bias at the bench.</a> Stroke. 40, 50-52 (2009).</li>
<li>Group, S. T. A. I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+standards+regarding+preclinical+neuroprotective+and+restorative+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Recommendations for standards regarding preclinical neuroprotective and restorative drug development.</a> Stroke. 30, 2752-2758 (1999).</li>
</ol>

Expériences sur les animaux ont été effectuées en conformité avec les directives et les règlements stipulés par Landesamt für Gesundheit und Soziales, Berlin, Allemagne.

Le modèle de transitoire, occlusion proximale MCA 18,19 présenté imite ici l&#39;un des types les plus communs de l&#39;AVC ischémique chez les patients. Basé sur 20 heures de reperfusion variable, le modèle propose différentes qualités de dommages allant de l&#39;attaque ischémique transitoire (AIT) à grande infarctus, y compris de grandes parties de l&#39;hémisphère ischémique. Cela permet au chercheur d&#39;étudier différents mécanismes physiopathologiques après un AVC. 20,21 La chirurgie peut être réalisée dans un court laps de temps et produit des lésions hautement reproductibles. Néanmoins, cela nécessite un contrôle approfondi des facteurs confondants. 22 petites différences dans la technique de l&#39;exploitation peut tenir compte des effets différents sur l&#39;infarctus. 23,24 De plus, en raison de variations dans l&#39;anatomie vasculaire cérébral, différentes souches de souris montrent un résultat différent. 25,26 Body température affecte dommages neurologiques, avec une hypothermie menant à des lésions plus petites 27 et hyperthermie à plus de graves déficits. 28 En conséquence de contrôle de température, et l&#39;entretien est très pertinente dans ce modèle. 29 En outre, la pression sanguine et les gaz du sang sont les facteurs de confusion importants du résultat et la nécessité de être surveillés. 30,31 L&#39;utilisation de méthodes rapides et peu invasive (mesure non invasive de la pression artérielle, adapté et facilement accessible des sites de collecte du sang) est recommandé. Le choix de l&#39;anesthésique est également très important, car certains peuvent avoir des effets neuroprotecteurs et / ou être vasodilatateurs, comme par exemple l&#39;isoflurane. 32 Par conséquent, l&#39;exposition à l&#39;anesthésie doit être aussi courte que possible et standardisés. Nous excluons les animaux qui ont subi une intervention chirurgicale pendant plus de 15 min. Rasage du site opératoire produit microabrasions et l&#39;inflammation et des communiqués de fragments de cheveux. Cela peut encore augmenter l&#39;inflammation et de favoriser une infection locale, qui peuvent avoir une incidence sur la physiopathologie course. Les conditions de logement, en particulier l&#39;utilisation de l&#39;enrichissement, pourrait affecter les résultats de l&#39;AVC et devrait être standardisé et décrits dans les rapports de recherche. 6,33,34 L&#39;utilisation de l&#39;enrichissement de l&#39;environnement et ses effets sur la reproductibilité est un sujet de discussion. 35 Un autre facteur de confusion important est le course des risques induits par l&#39;infection en particulier après des durées plus longues de l&#39;ischémie 36, ce qui conduit à une morbidité et une mortalité accrue supplémentaires. 37,38 Comme les infections deviennent symptomatiques à environ 3 à 5 jours, cela a des conséquences importantes pour le long terme le suivi de ces modèles. Pour produire des résultats pertinents pour le développement de nouvelles stratégies de traitement de l&#39;AVC, la normalisation et de contrôle de qualité est très importante dans la recherche préclinique course de translation 39 &quot;Bonnes Pratiques de Laboratoire&quot; 40,41 mandats.: <ol><li> une description appropriée et détaillée des animaux utilisés; </li><li> Calcul de la taille de l&#39;échantillon et les rapports sur l&#39;ampleur de l&#39;effet attendu; </li><li> critères d&#39;inclusion et d&#39;exclusion, mis en place avant l&#39;étude; </li><li> randomisation de l&#39;affectation dans les groupes; </li><li> dissimulation de l&#39;affectation à l&#39;égard des enquêteurs; </li><li> rapports des animaux exclus de l&#39;analyse; </li><li> évaluation en aveugle des résultats; </li><li> déclaration des conflits d&#39;intérêt potentiels et le financement d&#39;études. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>Scalpel chirurgical (pour incision de la peau)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>2 Pinces de Dumont (pointe droite n°5 médicale)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à ressort (selon Vannas)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Pince pour pinces microchirurgicales</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>Pince microvasculaire (par ex. S&amp;amp;G B1-V)</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td>Serrefine également possible</td></tr><tr><td>2 Pinces hémostatiques selon Hartmann</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Porte-aiguille (selon Olsen-Hegar ou autre)</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>Pince anatomique standard (pour fermeture de plaie)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-12</td><td></td></tr><tr><td>Fils 5/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>pour ligatures vasculaires</td></tr><tr><td>Fils 6/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>pour suture cutanée, 5/0 également possible</td></tr><tr><td>Lidocaïne (par ex. Gel Xylocain 2 %)</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>ou autre anesthésique local</td></tr><tr><td>Microscope de dissection (microscope stéréo), grossissement de 6x à 40x maximum</td><td>Leica Zeiss</td><td>MZ6 Stemi2000C</td><td></td></tr><tr><td>Source de lumière froide</td><td>Leica Microsystems</td><td>KL1500</td><td></td></tr><tr><td>Système de plateau chauffant avec régulation thermique par rétroaction</td><td>Fine Science Tools</td><td>21052-00</td><td>Avec coussin chauffant pour souris et petite sonde</td></tr><tr><td>Système d'anesthésie à l'isoflurane</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chambre de récupération vétérinaire</td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td>Cage chauffée</td></tr><tr><td>Brin de nylon 8,0</td><td>Suprama</td><td>TEL181005</td><td>pour revêtement</td></tr><tr><td>Scalpel</td><td></td><td></td><td>Pour couper le brin en morceaux</td></tr><tr><td>Règle</td><td></td><td></td><td>Pour couper le brin à la bonne longueur</td></tr><tr><td>Xantopren M Mucosa</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Activateur Universal Plus</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td>Optosil - Xantopren</td></tr><tr><td>2 Pinces de Dumont (pointe droite n°5 médicale)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>Support souple pour le stockage et la manipulation des brins non revêtus</td><td></td><td></td><td>par ex. compresses, mousse, &amp;#8230;</td></tr><tr><td>Récipient pour les brins nouvellement préparés</td><td></td><td></td><td>par ex. boîte de Pétri, mousse souple, &amp;#8230;</td></tr></tbody></table>

course de modélisation chez la souris - moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

L&#39;AVC est une des causes les plus fréquentes de décès et d&#39;invalidité chez les adultes, en particulier dans les pays hautement développés. Cependant, les options de traitement à ce jour sont très limitées. Pour répondre au besoin de nouvelles approches thérapeutiques, de recherche expérimentale course emploie fréquemment des modèles de rongeurs d&#39;ischémie cérébrale focale. La plupart des chercheurs utilisent une occlusion permanente ou transitoire de l&#39;artère cérébrale moyenne (ACM) à des souris ou des rats. Occlusion proximale de l&#39;artère cérébrale moyenne (MCA) via la technique de suture intraluminale (dits de filaments ou d&#39;un modèle de suture) est probablement le modèle le plus fréquemment utilisé dans la recherche expérimentale course. Le modèle intraluminale MCAO offre l&#39;avantage d&#39;induire une ischémie transitoire ou reproductibles permanents du territoire MCA d&#39;une manière relativement non invasive. Des approches intraluminale interrompre le flux sanguin de l&#39;ensemble du territoire de cette artère. Filament d&#39;occlusion proximale de débit ainsi arrestations pour les artères lenticulo-striées, qui fournissent les noyaux gris centraux. Filament l&#39;occlusion de la MCA résultats dans les lésions reproductibles dans le cortex et le striatum et peut être soit permanent ou transitoire. En revanche, les modèles induisant distale (à l&#39;embranchement des artères lenticulo-striée) MCA occlusion généralement épargner le striatum et concernent principalement le néocortex. En outre, ces modèles ne nécessitent craniectomie. Dans le modèle montré dans cet article, un fil enduit de silicone est introduit dans l&#39;artère carotide commune et avancé le long de la carotide interne dans le cercle de Willis, où il bloque l&#39;origine de l&#39;artère cérébrale moyenne. Chez les patients, les occlusions de l&#39;artère cérébrale moyenne sont parmi les causes les plus fréquentes d&#39;accident vasculaire cérébral ischémique. Depuis des intervalles variables ischémique peut être choisi librement dans ce modèle selon le point de temps de reperfusion, des lésions ischémiques avec des degrés de gravité peut être produite. Reperfusion par l&#39;enlèvement du filament occultant au moins partiellement les modèles de la restauration du flux sanguin après spontanés ou thérapeutiques (tPA) lyse d&#39;un caillot de thrombo-emboliques chez les humains. Dans cette vidéo, nous allons présenter la technique de base ainsi que les écueils majeurs et les facteurs de confusion qui peut limiter la valeur prédictive de ce modèle.

L&#39;occlusion filamenteux de l&#39;artère cérébrale moyenne est un modèle commun pour l&#39;étude de l&#39;AVC ischémique chez la souris.

Course de modélisation chez la souris - Moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire

L'accident vasculaire cérébral figure parmi les causes les plus fréquentes de décès et d'invalidité chez l'adulte, en particulier dans les pays hautement développés. Cependant, les options thérapeutiques à ce jour sont...

L'objectif général de cette procédure est de produire un modèle murin d'ischémie cérébrale focale en obstruant l'artère cérébrale moyenne à l'aide d'un fil intraluminal. Cela est réalisé en pratiquant une incision médiane au niveau du cou et en visualisant l'artère carotide commune. L'étape suivante consiste à placer des ligatures autour de l'artère carotide commune, et des pinces sur l'artère carotide externe sont utilisées pour les maintenir en place et prévenir les saignements.La dernière étape de la procédure consiste à introduire le filament dans le cercle de Willis. Cela obstrue la branche de l'artère cérébrale moyenne, entraînant finalement des déficits neurologiques. En conséquence, l'occlusion peut être identifiée en observant des changements dans le comportement.Un des principaux avantages de l'occlusion proximale de l'artère cérébrale moyenne par la technique du filament est qu'elle permet d'obtenir des lésions hautement reproductibles dans le striatum et dans le cortex. L'ischémie peut être induite de manière permanente ou transitoire, et de plus, comme cette méthode ne nécessite pas de craniectomie, l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne peut être considérée comme plus ou moins non invasive. Généralement, les personnes novices dans cette méthode éprouvent des difficultés en raison du caractère délicat des techniques microchirurgicales. Avant la procédure, préparez le filament en coupant un filament de nylon 8,0 en segments de 11 millimètres sous microscope.La pointe du filament doit être recouverte de manière complète et uniforme sur une longueur de huit millimètres avec un mélange de silicone ; l'utilisation de protocoles opératoires standardisés est recommandée pour obtenir des résultats optimaux. Le type de souris utilisé dépend de l'objectif de l'étude. Généralement, les souris doivent être âgées de plus de 10 semaines.Utilisez des agents anesthésiques appropriés en consultation avec le personnel vétérinaire. La température corporelle des souris est maintenue autour de 36,5 degrés Celsius pendant l'intervention chirurgicale à l'aide d'une plaque chauffante ; préparez le site chirurgical, désinfectez la peau et le pelage environnant, puis laissez sécher. Pratiquez une incision médiane le long du cou et écartez doucement les tissus mous.L'artère carotide commune gauche est soigneusement disséquée, libérée des nerfs environnants sans endommager le nerf vague, et une ligature est réalisée à l'aide d'un fil de 5,0 à 7,0. Ensuite, isolez l'artère carotide externe gauche et faites un deuxième nœud. Après avoir isolé l'artère carotide interne gauche, faites un nœud lâche autour de celle-ci.À l'aide d'un filament de 6,0, le nœud sera resserré ultérieurement au cours de la procédure. Après avoir obtenu une bonne visualisation de l'artère carotide interne gauche et de l'artère tégo-palatine gauche, les deux artères sont clampées pour préparer l'insertion du filament. Une petite ouverture est pratiquée dans l'artère carotide commune avant sa bifurcation.Le monofilament préparé précédemment est ensuite introduit dans l'artère. Les artères ligaturées sont ouvertes pendant que le filament est inséré dans l'artère carotide interne. Pour obstruer l'artère cérébrale moyenne, le troisième nœud sur l'artère carotide interne est fermé.Pour fixer le filament en position, appliquer ensuite du gel de lidocaïne par voie topique sur la plaie afin de soulager la douleur. Pour les opérations factices, insérer le filament puis le retirer immédiatement pour permettre une reperfusion instantanée, et administrer 0,5 millilitre de sérum physiologique par voie sous-cutanée comme complément de volume. Pour étudier les effets de la reperfusion, ouvrir le troisième nœud et retirer le filament.Une période de temps déterminée après l'ischémie, généralement après 30 à 60 minutes. Dans cet exemple, on permet une reperfusion de 60 minutes après l'occlusion, puis on administre une seconde injection de réhydratation avec du sérum physiologique. Enfin, on raccourcit les fils restants et on ferme la peau à l’aide d’un point de suture chirurgical.Placer les animaux dans une cage chauffée pendant deux heures pour qu'ils se remettent de l'intervention chirurgicale ; vérifier les animaux quotidiennement pour détecter tout signe de gêne. Une perte de poids peut survenir après la chirurgie, et les souris doivent recevoir de la nourriture écrasée placée dans une boîte de Pétri sur le sol, afin d'encourager l'alimentation.La nourriture est remplacée quotidiennement pendant sept jours. La durée de la restriction du flux sanguin peut entraîner des différences dans les déficits moteurs et comportementaux. Après 30 ou 60 minutes d'ischémie cérébrale, la plupart des animaux présentent une résistance diminuée.Plus tard, une poussée vers l'arrière et des mouvements circulaires dus à une perturbation de la locomotion, des lésions plus légères se manifestant par une position en flexion des membres antérieurs. Ces signes facilement observables peuvent être utilisés comme score de base pour évaluer la réussite de l'opération. La lésion résultante peut être évaluée soit par histologie, soit par imagerie par résonance magnétique.Comme on le voit ici, une occlusion de 60 minutes de l'artère cérébrale moyenne provoque une nécrose pancréatique du tissu dans une zone comprenant à la fois le striatum et le cortex, tandis que 30 minutes d'ischémie entraînent principalement une mort cellulaire neuronale, limitée au striatum. Des chirurgiens expérimentés en MCAO peuvent maîtriser cette technique en 10 minutes. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de se rappeler de suivre les protocoles opératoires standardisés afin d'assurer des résultats reproductibles et de contrôler les facteurs de confusion.

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Médecine

Nous démontrons dans la vidéo un procédé pour produire une occlusion de l'artère cérébrale moyenne chez des souris adultes en utilisant un monofilament intraluminale. Nous montrons aussi comment évaluer l'étendue de l'infarctus cérébral par le chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium (TTC) coloration.

Modèle murin d&#39;occlusion artère cérébrale moyenne

Le intraluminale de l'artère cérébrale occlusion (MCAO) est le modèle le plus fréquemment utilisé chez les modèles expérimentaux ischémiques AVC. Ici, nous allons démontrer tout le modèle en détail avec le guide de Laser Doppler, et ses résultats représentatifs.

Intraluminale Occlusion Artère cérébrale moyenne (MCAO) Modèle pour l&#39;AVC ischémique avec guidage laser Doppler chez la souris

Cette vidéo décrit la procédure de développement d’un AVC transitoire dans un modèle murin en utilisant l’occlusion à base de filaments recouverts de silicium de l’artère cérébrale moyenne. Le modèle développé imite l’AVC humain, aidant ainsi à étudier de nouvelles stratégies thérapeutiques pour traiter l’AVC.

Modèle d’AVC transitoire basé sur l’insertion de filaments : une intervention chirurgicale pour effectuer l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne dans le cerveau murin

Différents modèles murins de l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne (MCAO) sont largement utilisés dans les recherches sur le cerveau expérimentale. Ici, nous démontrons le modèle de transcrânienne OAMC distale permanente qui produit infarctus cortical cohérente d'une taille correspondant à des dommages imposée par la majorité des accidents ischémiques cérébraux humains.

Modélisation des maladies chez les souris: Coagulation permanente de l&#39;artère cérébrale moyenne distale

Afin de comprendre la physiopathologie de la course, il est important d'utiliser des modèles fiables. Ce document décrira l'un des modèles de course les plus fréquemment utilisés chez la souris, appelé le modèle milieu occlusion de l'artère cérébrale (MCAo) (également appelé le filament intraluminal ou d'un modèle de suture) avec reperfusion.

Approche chirurgicale pour Occlusion de l&#39;artère cérébrale moyenne et reperfusion induite par des maladies chez les souris

L’AVC est un problème mondial avec des options de traitement minimales et aucune thérapie clinique actuelle pour régénérer le tissu cérébral perdu. Nous décrivons ici des méthodes pour créer un AVC photothrombotique précis dans le cortex moteur des rongeurs et l’injection ultérieure de biomatériaux d’hydrogel pour étudier leurs effets sur la régénération tissulaire après un AVC.

Injection d’échafaudages de biomatériaux d’hydrogel au cerveau après un AVC

Différents modèles d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAo) sont utilisés dans la recherche expérimentale sur les accidents vasculaires cérébraux. Ici, un modèle expérimental d’AVC de MCAo transitoire via l’artère carotide externe (ECA) est décrit, qui vise à imiter l’AVC humain, dans lequel le thrombus cérébrovasculaire est enlevé en raison d’une lyse spontanée du caillot ou d’un traitement.

Modélisation de l’AVC chez la souris: occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide externe

Ce protocole démontre un modèle unique d’AVC chez la souris avec un infarctus de taille moyenne et un excellent taux de survie. Ce modèle permet aux chercheurs en AVC préclinique de prolonger la durée de l’ischémie, d’utiliser des souris âgées et d’évaluer les résultats fonctionnels à long terme.

Un modèle modifié d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne transcrânienne pour étudier les résultats de l’AVC chez des souris âgées

Ce protocole décrit le modèle d’ischémie cérébrale focale transitoire chez la souris par occlusion intraluminale de l’artère cérébrale moyenne. De plus, des exemples d’évaluation des résultats sont présentés à l’aide de l’imagerie par résonance magnétique et de tests comportementaux.

Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’AVC

Ce protocole décrit le processus de préparation à la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide commune.

Préparation d’un modèle modifié pour la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne

Apprenez la technique d'occlusion de l'artère cérébrale moyenne par filament chez la souris pour modéliser l'ischémie cérébrale focale. Cette méthode reproduit fidèlement les lésions vasculaires et permet d'évaluer les déficits neurologiques post-AVC.

Course de modélisation chez la souris - Moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire

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